[发明专利]一种检测染色体罗氏易位的方法

说明书

技术领域

本发明涉及分子诊断学领域，具体涉及一种检测染色体罗氏易位的方法，其能够针对父母是罗氏易位携带者的家系，检测正常及易位携带者胚胎和胎儿。

背景技术

罗氏易位(Robertsonian translocation，ROB)，以第一次发现该种易位方式的美国生物学家William Rees Brebner Robertson命名，是主要发生于5条近端着丝粒染色体(13、14、15、21和22号染色体)的一种染色体易位(Robertson WRB.Chromosome studies.I.Taxonomic relationships shown in the chromosomes of Tettigidae and Acrididae.V-shaped chromosomes and their significance in Acrididae,Locustidae and Gryllidae:chromosome and variation.J Morph 1916,27:179-331)。当两个近端着丝粒染色体在着丝粒部位或在着丝粒附近部位发生断裂后，二者的长臂在着丝粒处接合在一起，形成一条由长臂构成的衍生染色体，也称丝端融合，是染色体平衡易位的一种。两个短臂则构成一个小染色体，小染色体往往在第二次分裂时丢失。罗氏易位是一种常见的染色体结构异常，在新生儿中的发生率为1.23/1000(Nielsen J,Wohlert M.Chromosome abnormalities found among 34910newborn children:results from 13-year incidence study in Arhus,Denmark.Hum Genet.1991,87:81–83)。由于染色体短臂主要包括随机重复DNA和核糖体RNA基因，而这种基因在五条染色体中都存在，所以罗氏易位虽然有染色体短臂的丢失，却不会造成致病表型。虽然表型正常，然而携带者生殖细胞在第一次减数分裂过程中，易位染色体和相应两个正常染色体配对会形成三价染色体，这种结构会导致交替、邻式和不常见的3:0三种分裂方式，只有交替可以产生正常或者平衡的配子，其他两种方式产生非平衡的配子，这种占大部分的非平衡配子也是易位携带者出现妊娠困难或者妊娠过程中反复流产的原因，甚至导致染色体拷贝数异常的13-Patau综合征等先天缺陷患儿的出生。目前越来越多的罗氏易位携带者寻求试管婴儿技术进行胚胎植入前诊断。

试管婴儿技术是将卵子与精子取出后置于特定的培养液内培养、受精，受精卵在恒温孵箱中发育为胚胎后移植回母体子宫，最终发育成胎儿。挑选健康胚胎移植是成功预防的关键。胚胎植入前遗传学筛查是指胚胎植入着床之前进行染色体数目和结构异常的检测，挑选染色体正常的胚胎植入子宫，以期获得正常的后代。目前罗氏易位的胚胎移植前诊断的方法包括SNP芯片和荧光原位杂交技术(fluorescence in situ hybridization，FISH)。SNP芯片是目前最常用的检测技术，但是这项技术只能检测胚胎染色体拷贝数的变化，不能区分罗氏易位中正常与携带易位的胚胎。FISH利用荧光标记的特异核酸探针与细胞内相应的靶DNA分子杂交，通过在荧光显微镜下观察荧光信号，来确定结合了荧光探针的DNA分子在染色体中的定位。但FISH作为检查单个细胞核的方法是存在一定缺陷的，有7％的假阴性(Colls P,Escudero T,Cekleniak N,Sadowy S,Cohen J,MunnéS.I ncreased efficiency of preimplantation genetic diagnosis for infertility using"no result rescue".Fertil Steril.2007,88(1):53-61)。