[发明专利]一种能抑制黑色素瘤的羊栖菜提取物

说明书

技术领域

本发明涉及一种能抑制黑色素瘤的羊栖菜提取物。

背景技术

黑色素瘤(Maligmantmelanoma)是一种恶性程度较高的黑色素细胞肿瘤，多发生 于皮肤，也见于接近皮肤的勃膜如结膜、口腔、鼻腔、肛管、直肠、子宫颈、阴道、阴 茎、龟头等等。黑色素瘤一直是西方人的常见病，随着我国人口疾病谱的变化，似有不 断上升趋势，且有自身特点，如肢端皮肤和勃膜来源居多，而西方人以头颈、躯干皮肤 为主。虽然手术切除肿瘤是治疗绝大多数黑色素瘤患者的首选方法，但是在某些患者， 如外科高风险患者、老幼患者和自身虚弱的病人，手术治疗会给他们带来巨大的副作用， 术后也会容易遗漏微小病灶或转移病灶残余肿瘤细胞。因此，药物治疗或局部药物治疗 可能为部分黑色素瘤患者提供一种更好的预防和治疗选择。

目前临床上尚无治疗黑色素瘤的有效方法，化疗药物对恶性黑色素瘤虽有一定的疗 效，但毒副作用大；目前临床应用的抗黑色素瘤药物大多为细胞毒性药物，在抑制肿瘤 细胞增殖的同时，机体正常细胞的增殖也被抑制，会对正常机体的生理过程产生不良影 响，故限制了这些药物的临床应用。因此，寻找高效低毒的抑制黑色素瘤的药物是目前 药学研究的一个热点，而从天然药物中筛选活性成分是黑色素瘤治疗的新方向。

羊栖菜(sargassumfusiforme)隶属褐藻门(Phaeophuta)墨角藻目(Fucales)马 尾藻科(Sargassaceae)，又名玉草、六角菜、鹿角尖，在我国辽东半岛、山东、浙江、 福建、广东浅海域均有分布，日本和韩国也有生长。羊栖菜含有丰富的多糖、食物纤维 素、多种维生素、矿物质和多种微量元素，且含有人体所需的18种重要氨基酸，包括8 种人体不能合成的必须氨基酸。目前羊栖菜中研究较多的有多糖、氨基酸和蛋白质、脂 肪酸等，具有降血脂、抗氧化、降血糖、抗肿瘤和促进机体生长发育等多种药理生理活 性。研究表明所述药理作用可能主要与其所含的羊栖菜多糖有关。然而目前关于羊栖菜 多糖在制备抗黑色素瘤药物方面尚未见报道。

发明内容

本发明所要解决的技术问题是针对现有技术的现状提供一种能抑制黑色素瘤的羊 栖菜提取物。

本发明解决上述技术问题所采用的技术方案为：该抑制黑色素瘤的羊栖菜提取物， 其特征在于制备方法如下：

将新鲜的羊栖菜洗净后在40-50℃下烘干3.5-5小时，然后粉碎成粒度≤60目的羊 栖菜粉末；

向微波超声波组合萃取仪中加入羊栖菜粉末和蒸馏水，微波超声时间为8-12min， 温度45-55℃、固液比1:8-12g/mL、超声功率550-650W、微波功率350-450W；

抽滤后取滤液，45-55℃下浓缩至原体积的十分之一，加入无水乙醇使含醇量达 30-40％，静置24h，过滤取滤液，45-55℃下浓缩至原体积的五分之一，加入无水乙醇使 含醇量达到80％，静置24h，在10000-14000rpm下离心12-18min，取沉淀物；

将沉淀物在-0.08～-0.1MPa下真空干燥，温度为28-32℃，时间10-14h；

将干燥后的沉淀物溶于水中，配成浓度为4-6wt％的水溶液作为工作液，将工作液 与Sevage试剂按1:2混合，振摇13-17min，3500-4500rpm下离心4-6min，取上清液；

其中Sevage有机试剂为氯仿：正丁醇＝4:1(v/v)的混合物；

将得到的上清液在DEAE-52阴离子交换纤维柱进行吸附洗脱，洗脱条件为：缓冲 体系为pH值7.2-7.4的磷酸盐缓冲液，用含0.5～1.0M的NaCl溶液等梯度洗脱DEAE-52 阴离子交换纤维柱，流速为1mL/min，在波长为215nm下监测洗脱液中提取物含量，见 峰收集；然后在3.5KD切向流超滤膜下膜浓缩脱盐至原体积的五分之一，真空冷冻干燥， 真空度130Pa，温度为-80℃，时间为48h；即得到能抑制黑色素细胞瘤的羊栖菜提取物。

较好的，分别收集0.5M、0.75M和1MNaCl下的洗脱液。

更好地是收集0.5MNaCl下的洗脱液。

与现有技术相比，本发明所提供的羊栖菜提取物能够有效抑制黑色素瘤的增殖，诱 导其凋亡，降低黑色素的含量，且副作用小，治疗黑色素瘤提供了一种新的途径和手段。

附图说明