[发明专利]源自唾液的端粒丰度的量度和样本收集装置

说明书

本申请是申请日为2012年12月28日，申请号为201280068992.0，发明名称为“源自 唾液的端粒丰度的量度和样本收集装置”的发明专利申请的分案申请。

相关申请的交叉引用

本申请要求2011年12月31日提交的美国临时专利申请61/582,261的优先日权益， 这个临时专利申请的内容以全文引用的方式并入本文中。

关于联邦政府资助研究的声明

无。

发明背景

端粒是染色体末端的结构，其特征为核苷酸序列的重复(TTAGGG)_n。人端粒(染色 体末端的保护“帽”)的缩短是细胞老化的自然现象(C.B.Harley等人,Nature,1990,345: 458-460)。在人中，缩短可以由遗传因素和环境因素来加速，包括多种形式的应激，如氧化 损伤、生化应激物、慢性炎症和病毒感染(Epel,E.S.等人,Proc.Natl.Acad.Sci.USA,2004, 101(49):17312-5)。端粒长度提供了干细胞和免疫系统衰老的量度，并且预测寿命、疾病风 险以及身体响应某些药物的潜力。

端粒在非常短的时候变得功能不良，从而触发DNA损伤反应，这种DNA损伤反应常 常以细胞和组织功能损失而告终，并且最终导致大范围的疾病和早期死亡。短端粒已经与 以下各者联系起来：癌症风险(Willeit,P.等人,JAMA,2010,304(1):69-75)、各种纤维化 (Wiemann等人,FASEBJournal,2002,16(9):935-982；Cronkhite,J.T.等人, Am.J.Resp.Crit.CareMed.,2008,178:729-737)、糖尿病(Salpea,K.和Humphries,S.E., Atherosclerosis,2010,209(1):35-38)，以及众多其它病状。在越来越多的研究中，端粒丰 度或端粒酶活性的变化也已经与疾病风险或结果相关联(Bautista,C.V.等人,Colorectal Dis.,2010年9月27日；Panossian,L.A.等人,Neurobiol.Aging,2003,24(1):77-84)。

端粒的独特之处在于其可以由端粒酶、生活方式和环境因素动态地改变。端粒缩 短用作这些暴露的累积量度，并且继而，短端粒的存在得出了关于疾病风险以及对某些药 物和介入的可能响应这两者的信息。(Steer,S.E.等人,Ann.Rheum.Dis.,2007,66(4):476- 480；Njajou,O.T.等人,J.Gerontol.A.Biol.Sci.Med.Sci.,2009,64(8):860-4； Brouilette等人,2007)。

已经开发出多种方法来测量基因组DNA中的端粒长度，包括DNA印迹(Kimura,M.等 人,NatureProtocols,2010,5:1596-1607)、Q-FISH(Rufer,N.等人,Nat.Biotechnol., 1998,16:743-747)、流式FISH(Baerlocher,G.M.等人,Cytometry,2002,47:89-99)，以及 qPCR(Cawthon,R.M.,Nucleic.AcidsRes.,2002,30(10):e47)。所有这些方法都可以用于 临床环境中以监测健康状况并且允许医师开立适合个别患者需要的预防性或治疗性介入。

唾液的特征为含有免疫细胞，如朗格汉斯细胞(Langerhanscell)、淋巴细胞、嗜 中性粒细胞、粒细胞；以及非免疫细胞，如上皮细胞和细菌细胞。(参看例如，Challacombe, S.J.和Naglik,J.R.,Adv.DentalRes.,2006,19:29-35；Nishita等人,BMCMedical ResearchMethodology,2009,9:71；Aps等人,ClinicaChimicaActa321,2002,35-41)。 所有这些细胞类型都含有可以测定端粒长度的基因组DNA样本。

以下参考文献涉及用于唾液收集的装置。