[发明专利]一种蛋白质自组装人工肝支架制备方法

权利要求书

1.一种蛋白质自组装人工肝支架制备方法，其特征在于：包括以下步骤：

步骤1：制备打印材料：

步骤1.1：将蚕丝置于CaCl₂水溶液中进行溶解，制得溶解处理液；对溶解处理 液过滤得到蚕丝蛋白/CaCl₂混合水溶液；对蚕丝蛋白/CaCl₂混合水溶液进行透析纯化， 得到蚕丝蛋白溶液；

步骤1.2：对病患健康肝细胞进行传代培养；

步骤1.3：将步骤1.1得到的蚕丝蛋白溶液与经过步骤1.2传代培养后的病患健 康肝细胞混合，得到打印材料；

步骤2：制备人工肝支架：

步骤2.1：将步骤1制备的打印材料装入给生物3D打印设备储液腔，所述生物 3D打印设备的控制系统中存储有病患肝脏的3D模型数据；

步骤2.2：生物3D打印设备根据病患肝脏的3D模型数据，利用步骤1制备的 打印材料分层进行生物3D打印；要求当已打印支架的结构定型后，再进行下一层的 打印，直至病患肝脏支架打印完成；打印过程中采用紫外线照射已打印支架；

步骤3：对步骤2得到的病患肝脏支架进行培养，得到活性肝支架。

2.根据权利要求1所述一种蛋白质自组装人工肝支架制备方法，其特征在于：步骤 1.1得到的蚕丝蛋白溶液浓度为40mg/ml～80mg/ml。

3.根据权利要求1或2所述一种蛋白质自组装人工肝支架制备方法，其特征在于： 步骤1得到的打印材料中，病患健康肝细胞浓度不少于10×10⁵个/ml。

4.根据权利要求1所述一种蛋白质自组装人工肝支架制备方法，其特征在于：步骤 2.2中，紫外线强度为2级4指数。

5.根据权利要求1所述一种蛋白质自组装人工肝支架制备方法，其特征在于：步骤 1.1中将蚕丝剪成最大尺寸小于2mm的碎片后，再置于CaCl₂水溶液中进行溶解。

6.根据权利要求1所述一种蛋白质自组装人工肝支架制备方法，其特征在于：步骤 1.2中，对病患健康肝细胞进行传代培养的细胞培养液为高糖DMEM培养液，并 在其中添加有10％胎牛血清、2mM谷氨酰胺和100μm/ml青霉素或链霉素。