[发明专利]一种增加茶叶及其加工产品中EGCG含量的方法

说明书

本发明公开了一种增加茶叶及其加工产品中EGCG含量的方法，包括以下步骤：步骤一、培养基的制备；步骤二、发酵制备酶液：培养基冷却后接种曲霉孢子悬液，在30℃条件下培养4～6天，提取酶液；对于液态发酵，发酵液直接过滤去除菌体即可得到粗酶液；对于固体培养基，发酵后向培养基中加入pH 7.0的磷酸盐缓冲液，在20℃条件下，振荡速度180rpm浸提1h，过滤去除菌体得到粗酶液；步骤三、用酶处理茶叶或者茶叶提取物：向茶叶或者茶叶提取物中加入所述酶液，在固水比为1:5～1:30，温度10℃～70℃下进行酶反应；步骤四、测定EGCG含量变化。采用本发明后，茶叶或茶叶提取物中的EGCG含量大幅度提高。

技术领域

本发明涉及茶叶加工的技术领域，尤其涉及一种增加茶叶及其加工产品中EGCG含量的方法。

背景技术

茶叶在植物分类系统中属于山茶科，是一种重要的饮料作物，与咖啡、可可并称为世界三大饮料。茶叶中含有多种人体必需的营养成分如茶多酚、咖啡碱、氨基酸、茶色素、茶多糖等，这些成分具有较高的营养价值、药用作用及保健功能。其中，茶多酚是茶叶中的一组多酚类化合物，约占茶叶干重的20％～38％，组成成分包括黄烷醇类化合物、缩酸及缩酚类物质等。以儿茶素为主的黄烷醇类化合物占茶多酚总量的70～95％。其中EGCG(表没食子儿茶素没食子酸酯)是儿茶素类化合物中的一种主要酯型儿茶素(约占儿茶素类总量的50％～60％)，是茶叶中茶多酚的主要组成成分，是儿茶素中活性最高、含量最多的功能成分。如，研究表明，EGCG是清除自由基、抗氧化能力最强的一种儿茶素。茶叶中儿茶素抗氧化活性强度的顺序依次为：EGCG>EGC>ECG>EC；此外，EGCG能够预防和治疗心脑血管疾病；能够增强免疫系统功能；抑制肝脂和胆固醇的增长；抑制肿瘤的生长；对痢疾、伤寒、金黄色葡萄球菌等细菌也有极强的抑制作用。现已被列为潜在的抗癌药物在中美等国被研究。

在茶叶及其提取物加工过程中，加热、氧化、酶分解和微生物发酵等常引起茶叶中EGCG的含量大量减少。Bradfield研究发现，茶叶经过长时间高温作用，其所含的EGCG会发生差向异构化作用，生成GCG；Yoku研究发现，用pH在6～8的水溶液提取绿茶，其EGCG含量显著降低，C、GCG等反式异构体增加。另外，茶叶中的EGCG在单宁酶作用下可发生水解而生成EGC和GA，在漆酶作用下EGCG发生氧化反应而降低。有鉴于此，本发明人研究和设计了一种增加茶叶及其加工产品中EGCG含量的方法，本案由此产生。

发明内容

本发明的目的在于提供一种增加茶叶及其加工产品中EGCG含量的方法，通过向茶叶或其提取物中添加酶进行反应而增加其EGCG的含量。

为实现上述目的，本发明解决其技术问题的技术方案是：

一种增加茶叶及其加工产品中EGCG含量的方法，包括以下步骤：

步骤一、培养基的制备：所述培养基按以下质量百分百的组分组成：0.5～70％的碳源，0.05％的氯化钾，0.01％的七水合硫酸镁，0.1％的柠檬酸三钠二水合物，0.1％的无水柠檬酸，0.1％的酵母提取物，0.1％的干酪素水解物，用1M的HCl把pH调到4.0；每个250mL锥形瓶中加入25mL培养基，121℃高压蒸汽灭菌20min；

步骤二、发酵制备酶液：培养基冷却后接种曲霉孢子悬液，所述孢子悬液孢子含量为1×10⁸个/ml，在30℃条件下培养4～6天，提取酶液；对于液态发酵，发酵液直接过滤去除菌体即可得到粗酶液；对于固体培养基，发酵后向培养基中加入pH 7.0的磷酸盐缓冲液，在20℃条件下，振荡速度180rpm浸提1h，过滤去除菌体得到粗酶液；

步骤三、用酶处理茶叶或者茶叶提取物：向茶叶或者茶叶提取物中加入所述酶液，在固水比为1:5～1:30，温度10℃～70℃下进行酶反应；