[发明专利]动物粪便宏基因组来源的低温邻苯二酚1;2-双加氧酶、其编码基因及其制备方法有效
| 申请号： | 201610027053.1 | 申请日： | 2016-01-15 |
| 公开（公告）号： | CN105505893B | 公开（公告）日： | 2019-01-18 |
| 发明（设计）人： | 许波;熊彩云;黄遵锡;李俊俊;唐湘华;杨云娟 | 申请（专利权）人： | 云南师范大学 |
| 主分类号： | C12N9/02 | 分类号： | C12N9/02;C12N15/53 |
| 代理公司： | 北京众合诚成知识产权代理有限公司 11246 | 代理人： | 裴娜 |
| 地址： | 650500 云*** | 国省代码： | 云南;53 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 酶活 邻苯二酚 双加氧酶 编码基因 动物粪便 宏基因组 耐受 芳香族化合物 氨基酸序列 核苷酸序列 理论分子量 低温环境 酶法合成 氨基酸 二酸 二烯 降解 可用 制备 基因 | ||
【权利要求书】：
1.一种动物粪便宏基因组来源的低温邻苯二酚1,2-双加氧酶，其氨基酸序列如SEQ IDNO.2所示。
2.一种编码权利要求1所述的低温邻苯二酚1,2-双加氧酶的基因。
3.根据权利要求2所述的基因，其特征在于，其核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。
4.一种包含权利要求2所述的基因的重组表达载体。
5.一种利用权利要求4所述的重组表达载体转化宿主细胞所得的重组菌株。
6.权利要求1所述的低温邻苯二酚1,2-双加氧酶在合成顺,顺-己二烯二酸中的应用。
7.权利要求1所述的低温邻苯二酚1,2-双加氧酶在低温环境中降解邻苯二酚的应用。
8.一种如权利要求1所述的低温邻苯二酚1,2-双加氧酶的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
将邻苯二酚1,2-双加氧酶基因的重组表达载体转化宿主细胞得到重组菌株，培养重组菌株，诱导重组邻苯二酚1,2-双加氧酶表达；
回收并纯化所表达的邻苯二酚1,2-双加氧酶，得到低温邻苯二酚1,2-双加氧酶。
9.根据权利要求8所述的制备方法，其特征在于，所述邻苯二酚1,2-双加氧酶基因按照以下方法获得：
从倭蜂猴粪便中提取微生物基因组DNA；
以所述微生物基因组DNA为模板，以SEQ ID NO.3所示的引物catPL12F和SEQ ID NO.4所示的引物catPL12R进行PCR扩增，得到邻苯二酚1,2-双加氧酶基因。
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