[发明专利]从海洋微藻中提取EPA的方法

说明书

技术领域

本发明涉及EPA的提取技术领域，具体涉及一种从海洋微藻中提取EPA的方法。

背景技术

EPA，即二十碳五烯酸(EicosapntemacniocAcid)，属于Ω-3系列多不饱和脂肪酸，其 分子中含有20个碳原子和5个双键，首个双键位于甲基端的第三个碳原子上，是人体自身不 能合成的必需脂肪酸，大量研究证明，EPA具有多种生理功能。神经系统方面：EPA可促进胎 儿大脑皮层发育，预防阿尔兹海默症；免疫系统方面：EPA可以辅助治疗自身免疫缺陷疾病， 例如风湿性关节炎；能量代谢方面：EPA可综合调节人体内糖、脂代谢平衡，降低血液中低 密度脂蛋白胆固醇的含量，有效改善糖尿病、脂肪肝及各类心脑血管疾病等代谢综合征。因 此，EPA成为功能性食品的研究热点。

早期EPA产品以富含DHA和EPA等多不饱和脂肪酸的深海鱼油为主。鱼油的生产过程相 对简单，成本较低，在较长一段的时间内占据着功能性油脂类产品的主要市场份额。然而， 随着近年来海洋渔业资源的日益萎缩，深海鱼类资源变得越发难以捕获。此外，全球水体污 染的加剧，使得鱼油中出现富集的DDT、二噁英及多联氯苯类物质等持续性有机污染物，使 得鱼油类EPA产品的生产面临诸多问题。

鉴于以上原因，从海洋微藻中提取藻油EPA成为新的研究热点，而目前从海洋微藻中提 取EPA的方法，提取率通常较低，或者提取不完全，导致纯度低等问题。

发明内容

本发明的目的在于提供一种从海洋微藻中提取EPA的方法，该方法结合酶解法和CO₂超临 界萃取法来提取EPA，通过对提取压力等多种因素综合考虑，可以提取得到纯度为95％以上的 EPA。

其技术解决方案包括：

一种从海洋微藻中提取EPA的方法，所述海洋微藻为钝顶螺旋藻和亚心形扁藻的混合物， 所述方法依次包括以下步骤：

a酶解，称取重量比为1:1的钝顶螺旋藻和亚心形扁藻，向其中加入碱性蛋白酶酶解进 行酶解，控制pH为7.5～8，温度50～60℃，酶解时间8～10小时，得酶解物；

b超临界CO₂萃取，将所述酶解物放置在萃取槽中，向所述萃取槽中加入改性剂，所述改 性剂的加入量为钝顶螺旋藻和亚心形扁藻总重量的5～8﹪，控制温度为30～35℃，压力为 35MPa，萃取时间为30～40分钟；

c精制，通过减压蒸馏的方式将萃取槽中的改性剂去除，收集得到EPA，EPA的提取率通 过下式(1)来计算：

式中，m₁为收集得到的EPA重量；

m为钝顶螺旋藻和亚心形扁藻的总重量。

作为本发明的一个优选方案，所述改性剂为石油醚、氯仿、乙醚、乙酸乙酯、乙醇或甲 醇中的一种。

作为本发明的另一个优选方案，所述改性剂为乙酸乙酯。

优选的，所述改性剂的加入量为钝顶螺旋藻和亚心形扁藻总重量的6﹪。

优选的，步骤b中，萃取温度为32℃，萃取时间为35分钟。

本发明所带来的有益技术效果：

本发明海洋微藻选用钝顶螺旋藻和亚心形扁藻的混合物，与单一的藻类相比，混合后的 海洋微藻中的油脂含量更高；在提取方法上，首先选用酶解法破壁技术，可将藻类细胞中的 蛋白物降解并释放出来，接着选用超临界CO₂进行萃取，由于EPA主要存在与极性脂中，要在 极性脂中提取EPA必须采用的是极性改性剂，因此本发明选用了石油醚、氯仿、乙醚、乙酸 乙酯、乙醇或甲醇中的一种作为极性改性剂，然而，实验发现选用不同的改性剂提取率不同， 我们在温度为32℃，压力为35MPa，选用等量的改性剂石油醚、氯仿、乙醚、乙酸乙酯、乙 醇和甲醇对酶解物进行处理，萃取30min，脂质用乙醇吸收，经浓缩后进行薄层分析，从薄 层分析结果来看，以石油醚作为改性剂只能萃取其中的低极性物质，用乙醇和甲醇作为改性 剂时，甘油酯斑点模糊或者不出现，而用乙酸乙酯则脂质的斑点较明显，多种改性剂进行对 比，选用乙酸乙酯作为改性剂时提取率最高。

本发明可提高海洋微藻的EPA产量，降低了成本，减少有害物质的排放，减少环境污染。

具体实施方式

下面结合具体实施例对本发明做详细说明。