[发明专利]用于检测人类NRAS基因7种突变的探针、引物及试剂盒有效
| 申请号： | 201610023371.0 | 申请日： | 2016-01-13 |
| 公开（公告）号： | CN105779587B | 公开（公告）日： | 2020-08-25 |
| 发明（设计）人： | 朱峰;杨晶晶;段卫涛;赵平锋 | 申请（专利权）人： | 武汉海吉力生物科技有限公司 |
| 主分类号： | C12Q1/6886 | 分类号： | C12Q1/6886;C12Q1/6858;C12N15/11 |
| 代理公司： | 北京汇泽知识产权代理有限公司 11228 | 代理人： | 程殿军;张瑾 |
| 地址： | 430000 湖北省武汉市东湖技术*** | 国省代码： | 湖北;42 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 用于 检测 人类 nras 基因 突变 探针 引物 试剂盒 | ||
1.用于检测人类NRAS基因7种突变的引物和探针，其特征在于，核苷酸序列如下：
NM1：G12C突变
突变上游ARMS引物NM1-F：SEQ ID NO:1，
突变下游引物NW1-R：SEQ ID NO:3，
检测探针NW1-P：SEQ ID NO:4，
阻断探针NW1-B：SEQ ID NO:5；
NM2：G12D突变
突变上游ARMS引物NM2-F：SEQ ID NO:2，
突变下游引物NW1-R：SEQ ID NO:3，
检测探针NW1-P：SEQ ID NO:4，
阻断探针NW1-B：SEQ ID NO:5；
NM3：Q61K突变
突变上游引物NW2-F：SEQ ID NO:6，
突变下游ARMS引物NM3-R：SEQ ID NO:7，
检测探针NW2-P：SEQ ID NO:12，
阻断探针NW2-B：SEQ ID NO:13；
NM4：Q61L突变
突变上游引物NW2-F：SEQ ID NO:6，
突变下游ARMS引物NM4-R：SEQ ID NO:8，
检测探针NW2-P：SEQ ID NO:12，
阻断探针NW2-B：SEQ ID NO:13；
NM5：Q61R突变
突变上游引物NW2-F：SEQ ID NO:6，
突变下游ARMS引物NM5-R：SEQ ID NO:9，
检测探针NW2-P：SEQ ID NO:12，
阻断探针NW2-B：SEQ ID NO:13；
NM6：Q61H突变
突变上游引物NW2-F：SEQ ID NO:6，
突变下游ARMS引物NM6-R：SEQ ID NO:10，
检测探针NW2-P：SEQ ID NO:12，
阻断探针NW2-B：SEQ ID NO:13；
NM7：Q61H突变
突变上游引物NW2-F：SEQ ID NO:6，
突变下游ARMS引物NM7-R：SEQ ID NO:11，
检测探针NW2-P：SEQ ID NO:12，
阻断探针NW2-B：SEQ ID NO:13；
其中，所述检测探针的核苷酸序列5’端标记有荧光基团，3’端标记有淬灭基团；阻断探针的核苷酸序列5’端经过双脱氧修饰，3’端标记有淬灭基团；
还包括外控引物和探针，以及内控引物和探针，核苷酸序列如下：
外控上游引物NR-F：SEQ ID NO:14，
外控下游引物NR-R：SEQ ID NO:15，
外控检测探针NR-P：SEQ ID NO:16，外控检测探针核苷酸序列的5’端标记有FAM，3’端标记有MGB；
内控上游引物IC-F：SEQ ID NO:17，
内控下游引物IC-R：SEQ ID NO:18，
内控检测探针IC-P：SEQ ID NO:19，内控检测探针核苷酸序列的5’端标记有JOE，3’端标记有BHQ1。
2.根据权利要求1所述的用于检测人类NRAS基因7种突变的引物和探针，其特征在于，所述荧光基团为FAM，所述淬灭基团为MGB。
3.用于检测人类NRAS基因7种突变的试剂盒，其特征在于，包括权利要求1或2所述的用于检测人类NRAS基因7种突变的引物和探针。
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