[发明专利]使用了酶的蛋壳膜的溶解方法

权利要求书

1.一种蛋壳膜溶解方法，其特征在于，将蛋白质分解酶和还原剂 联用。

2.如权利要求1所述的蛋壳膜溶解方法，其中，包括在还原剂共 存的条件下使蛋白质分解酶作用于蛋壳膜的工序。

3.如权利要求1所述的蛋壳膜溶解方法，其中，包括以下工序(1) 和(2)：

(1)在溶剂中准备蛋壳膜的工序；

(2)向所述溶剂添加还原剂和蛋白质分解酶，使之反应的工序。

4.如权利要求3所述的蛋壳膜溶解方法，其中，工序(2)的反应 溶液的pH为4.5～9.5。

5.如权利要求3或4所述的蛋壳膜溶解方法，其中，所述还原剂 的浓度为5mM～1M。

6.如权利要求3～5中任一项所述的蛋壳膜溶解方法，其中，继续 所述工序(2)的反应，直至确认不到固态物。

7.如权利要求3～6中任一项所述的蛋壳膜溶解方法，其中，还包 括以下的工序(3)：

(3)将工序(2)后的溶液过滤、除去固态物的工序。

8.如权利要求1～7中任一项所述的蛋壳膜溶解方法，其中，所述 蛋白质分解酶为碱性蛋白酶或中性蛋白酶。

9.如权利要求1～7中任一项所述的蛋壳膜溶解方法，其中，所述 蛋白质分解酶是选自丝氨酸内肽酶、半胱氨酸内肽酶、金属内肽酶、氨 基肽酶以及天冬氨酸内肽酶中的一种以上的酶。

10.如权利要求1～7中任一项所述的蛋壳膜溶解方法，其中，所 述蛋白质分解酶是选自糜蛋白酶、枯草杆菌蛋白酶、木瓜蛋白酶、芽孢 杆菌蛋白酶、茎菠萝蛋白酶、亮氨酰氨基肽酶、胃蛋白酶和胰蛋白酶中 的一种以上的酶。

11.如权利要求1～7中任一项所述的蛋壳膜溶解方法，其中，所 述蛋白质分解酶是选自BIOSORK、PROLEATHERFG－F、PAPAIN W40、PROTEASEN、BROMELAINF、UMAMIZYMEG、 THERMOASEY100、ProteAX、PROTEASES、SUMIZYMELP500、 DESKINC、PROTINNY10、PROTINPC10、SUMIZYMEMP、 PROTINAY以及蛋白酶K中的一种以上的酶。

12.如权利要求1～11中任一项所述的蛋壳膜溶解方法，其中，所 述还原剂是选自亚硫酸盐、亚硫酸氢盐、L－半胱氨酸、N－乙酰基－L －半胱氨酸、2－巯基乙醇、谷胱甘肽以及DTT中的一种以上的还原剂。

13.如权利要求1～11中任一项所述的蛋壳膜溶解方法，其中，所 述还原剂为亚硫酸钠或亚硫酸氢钠。

14.如权利要求1所述的蛋壳膜溶解方法，其中，包括以下的工序 (1)和(2’)：

(1)在溶剂中准备蛋壳膜的工序；

(2’)向所述溶剂添加还原剂而使之反应后，除去还原剂，接着添 加蛋白质分解酶，使之反应的工序。

15.一种蛋壳膜溶解剂，是将蛋白质分解酶和还原剂组合而成的。

16.如权利要求15所述的蛋壳膜溶解剂，其特征在于，含有蛋白 质分解酶和还原剂。

17.如权利要求15所述的蛋壳膜溶解剂，其特征在于，是由含有 蛋白质分解酶的第1构成组分、以及含有还原剂的第2构成组分构成的 试剂盒。

18.一种蛋壳膜溶解物，是通过权利要求1～13中任一项所述的蛋 壳膜溶解方法得到的。

19.如权利要求18所述的蛋壳膜溶解物，其中，含有选自溶菌酶、 β－N－乙酰基氨基葡萄糖苷酶、透明质酸、硫酸软骨素和硫酸皮肤素中 的一种以上的成分。

20.如权利要求18所述的蛋壳膜溶解物，其中，显示选自抗氧化 活性和血管紧张素转化酶抑制活性中的一种以上的活性。