[发明专利]一种具有抗癌活性的OPB寡肽及其表达载体和应用

说明书

一种具有抗癌活性的OPB寡肽及其表达载体和应用，它涉及一种具有抗癌活性的寡肽及其表达载体和应用。本发明的序列为Gly‑Asn‑Lys‑Lys‑Trp‑Glu‑Gln‑Lys‑Gln‑Val‑Gln‑Ile‑Lys‑Thr‑Leu‑Glu‑Gly‑Glu‑Phe‑Ser‑Val‑Thr‑Met‑Trp‑Ser‑Ser。它用于制备抗癌药物。本发明构建了pMBP‑2xOPB表达载体。本发明利用OPB序列合成出的肽段具有抑制肿瘤细胞生长增殖的效果，表明基于OPB的肽段及其衍生物是一种潜在的治疗癌症的药物。

技术领域

本发明涉及一种具有抗癌活性的寡肽及其表达载体和应用。

背景技术

Yin Yang 1(YY1)是一个多功能蛋白，具有促进肿瘤细胞生长的活性。YY1带有一个OPB(Oncoprotein Binding)区域(如图1所示)，可以结合多个促进癌症产生及发展的蛋白(癌蛋白)，包括AKT,Mdm2,E1A和Ezh2。

癌症的发生与发展过程中伴随着遗传和表观遗传的改变。表观遗传是指那些在细胞分裂时不涉及DNA序列变化的可遗传性状。表观遗传可以协调遗传学信息在分化与发育进程中的作用。这些调节的缺陷会导致人类的各种疾病，包括癌症。YY1参与许多肿瘤形成过程中的表观遗传学调控机制。迄今为止，大多数的研究表明，YY1的生物学功能是刺激细胞增殖和癌症的发生和发展。

YY1最早是由Shi等人做为一个含有414个氨基酸的DNA结合蛋白而被发现的。做为一个转录因子，YY1具有“阴阳(Yin Yang)”的特性，即可以抑制或激活靶基因的表达。YY1在DNA上的共有结合元件(consensus binding element)存在于脊椎动物的7％基因中，这意味着YY1在调节生物个体基因表达上的重要性。很多研究表明，YY1所调节的基因具有多种生物学功能，包括细胞生长，分化以及胚胎的发育。YY1可以结合多个参与表观遗传学的重要蛋白因子，包括调节组蛋白乙酰化的p300/CBP、PCAF、HDACs，组蛋白甲基化的Ezh2、Ezh1、PRMT4，DNA甲基化的DNMTs。因此，YY1是一个重要的表观遗传学调节因子。

在早期的研究中，人们对于YY1在癌症发生中的作用一直不够明确。直到2004年，我们发现了YY1可以负调节抑癌基因p53，其促癌或刺激细胞生长的功能才被意识到。随后的多篇报道都证实了YY1抑制p53的功能，因而，YY1对p53的负调控成为认知YY1做为原癌基因的关键转折。值得注意的是，YY1的这一功能并不依赖于其调节转录的活性，这也就扩展了YY1的功能或调节范围。YY1做为转录因子促进原癌基因c-Myc和ERBB2/HER2的表达，YY1对原癌基因Ezh2功能的促进作用，多种生长因子刺激YY1基因表达的现象，以及YY1的启动子带有原癌基因标志性结构G-quadruplex等，被陆续发现。这些进一步牢固了YY1的原癌基因地位和增强了其做为癌症治疗中靶基因的可能性。

现有技术存在的问题：(1)细菌系统表达产物，可能会含有内毒素，但这个缺点可以通过使用针对去除内毒素的方法来解决。(2)基于DNA质粒的表达系统很难合成太小的多肽分子，因为难以进行分离纯化。但合成2×OPB分子也有利于活性多肽的稳定性。

发明内容

本发明的目的是为了提供一种抗癌(尤其是乳腺癌)的物质，即提供一种具有抗癌活性的OPB寡肽及其表达载体和应用。

本发明的一种具有抗癌活性的OPB寡肽，其序列为Gly-Asn-Lys-Lys-Trp-Glu-Gln-Lys-Gln-Val-Gln-Ile-Lys-Thr-Leu-Glu-Gly-Glu-Phe-Ser-Val-Thr-Met-Trp-Ser-Ser。

本发明的一种具有抗癌活性的OPB寡肽，我们以乳腺癌为例，展示了该寡肽或其任意一部分寡肽可以用于制备治疗癌症的药物。

本发明的一种具有抗癌活性的OPB寡肽的pMBP-2xOPB表达载体的构建，它是按照以下步骤构建的：