[发明专利]一种罗氏沼虾的雌雄性别调控方法

说明书

本发明提供一种调控罗氏沼虾雌雄性别的方法，是在罗氏沼虾胚胎发育期至胚后发育的后期幼体期之前，降低或沉默罗氏沼虾体内序列为SEQ ID NO:1的性别蛋白或其衍生蛋白的表达量来完成的。本发明方法攻克目前水产养殖领域虾类全雄化苗种培育中遇到的技术难题，通过RNA干扰技术和基因表达调控技术，进行定向性别控制，诱导虾类动物性别逆转，不仅构建虾类性别控制和单性培育的验证技术体系和平台，而且利用性别可控的雌性亲本培育全雄单性苗种。

技术领域

本发明属于水产养殖动物性别调控技术领域，具体涉及一种罗氏沼虾的雌雄性别调控方法。

背景技术

我国是世界上虾蟹养殖大国，在沿海地区虾蟹的养殖形成了庞大的产业，成为当地经济的重要支柱，推动农民生活水平提高。在虾蟹类的生长过程中，雌性和雄性个体存在着巨大的差异。罗氏沼虾在生长过程中存在雌雄两态性，在相同的养殖条件下，雄虾体重是雌虾的2-4倍。利用这种雄性特征的优势开展全雄单性养殖具有很好的产业前景，提高水产养殖效益。

动物的性别决定是一个可塑的生物发育过程。性别决定分化发育过程中原始生殖腺开关性别决定相关基因，随后开启雌雄特异的相关基因发育成雄性或雌性，并在多种基因的网络调控体系下进行性腺的发育。因此，可以通过调控动物体内的性别决定相关基因或雌雄特异的相关基因表达水平，从而诱导获得雌雄性别可控的动物个体。罗氏沼虾的ZW-ZZ染色体性别决定机制具有不完全性，同时受环境、上位或其他遗传因素影响。因此，利用分子或化学手段，在沼虾性别分化关键时期调节雄性沼虾体内关键性控基因的表达，可使雄性个体发生性别逆转，获得假雌个体，开展雌性性别的调控。

发明内容

本发明的目的是针对现有技术的不足，提供一种调控罗氏沼虾雌雄性别的技术方法，实现虾类全雄苗种生产技术，尤其是罗氏沼虾的单性全雄苗种的培育技术。

本发明的方法，是在罗氏沼虾胚胎发育期至胚后发育的后期幼体期之前，降低或沉默罗氏沼虾体内序列为SEQ ID NO:1的性别蛋白或其衍生蛋白的表达量来完成的；

作为优选，是在胚胎发育的原肠胚至溞状幼体期、胚后发育的后期幼体早期进行操作；

这里所述的衍生蛋白，是与SEQ ID NO:1的性别蛋白具有70％或以上同源性，且与SEQ ID NO:1的性别蛋白的功能相同的蛋白；

所述的降低或沉默罗氏沼虾体内序列为SEQ ID NO:1的性别蛋白或其衍生蛋白的表达量；是通过降低编码性别蛋白基因的表达量来完成；

作为实施例的一种优选，是将能干扰性别蛋白编码基因表达的双链RNA分子转入罗氏沼虾体内来实现的；

所述的双链RNA分子，包括正义链和与正义链互补的反义链；其中的正义链与性别蛋白的编码基因cDNA的序列(SEQ ID NO:2)部分或全部相同或互补；

作为优选，所述的正义链的核苷酸序列为SEQ ID NO:3；

所述的转入罗氏沼虾体内，是通过显微注射、浸泡或投喂方式来完成的；

本发明方法攻克目前水产养殖领域虾类全雄化苗种培育中遇到的技术难题，通过RNA干扰技术和基因表达调控技术，进行定向性别控制，诱导虾类动物性别逆转，不仅构建虾类性别控制和单性培育的验证技术体系和平台，而且利用性别可控的雌性亲本培育全雄单性苗种。

附图说明

图1：双链RNA干扰样品的电泳图；

图2：干扰效率检测图；

图3：罗氏沼虾的雌雄性别检测结果。

具体实施方式