[发明专利]一种基于溶剂回收再利用的铁皮石斛多糖提取方法

权利要求书

1.一种基于溶剂回收再利用的铁皮石斛多糖提取方法，其特征在于，包括如 下步骤：

a取500mL烧瓶，称量5g铁皮石斛粉末，用80mL石油醚加热回流2h，静置 2h，将上层石油醚废液倒入石油醚回收瓶；再加入80mL石油醚加热回流2h，静 置2h，将上层石油醚废液倒入石油醚回收瓶；

b在石油醚旋转蒸发仪上蒸干残留石油醚，得脱脂铁皮石斛粉末；

c将石油醚回收瓶中的石油醚放在石油醚旋转蒸发仪上旋蒸回收石油醚；

d将脱脂铁皮石斛粉末2g加入250mL超纯水溶解，磁力搅拌器上搅拌12小 时；

e将上述250mL铁皮石斛粉末水混物倒入500mL圆底烧瓶，接在蛇形冷凝管 上，水浴加热60℃，冷凝回流3h，提取石斛粗多糖；

f将回流液放入布氏漏斗用两层快速滤纸，设置压力-0.05Mpa抽滤，取滤液；

g将所得抽滤液放在水旋转蒸发仪蒸干至50mL左右，将旋蒸浓液加入450mL 无水乙醇，搅拌5min，静置12小时；

h将上述静置后乙醇溶液小心倒入乙醇回收瓶，将沉淀物用20mL无水乙醇溶 液，洗涤3次，同时将乙醇洗涤液倒入乙醇回收瓶；在乙醇旋转蒸发仪蒸干沉淀 上残留乙醇；

i将乙醇回收瓶中乙醇放入醇旋转蒸发仪回收乙醇；

j计算粉末质量后，将粉末置于500mL三角瓶，重新用100mL超纯水溶解， 在磁力搅拌器上搅拌12小时；

k将上述多糖溶液加入等体积sevage溶液，摇床震荡10h，使其充分接触溶 解；

l将多糖和sevage溶液混合液，倒入分液漏斗，静置12小时；

m将分液漏斗下sevage溶液倒入sevage溶液回收瓶，将乳浊液倒入离心管， 在离心机上8000r/min，离心30min，取上清，弃沉淀；

n汇集离心上清液，在sevage溶液旋转蒸发仪，抽掉sevage溶液残留成分， 同时将溶液体积蒸干至50mL左右；

o检测粗多糖含量，同时检测蛋白质含量；

p将sevage溶液回收瓶中sevage溶液中放入氧化钙吸收水分，然后将上清 液放入sevage溶液旋蒸仪上提取sevage溶液；

q上柱，分离。

2.根据权利要求1所述的一种基于溶剂回收再利用的铁皮石斛多糖提取方 法，其特征在于，步骤b中石油醚旋转蒸发仪的水浴温度60℃，压力-0.1Mpa。

3.根据权利要求1所述的一种基于溶剂回收再利用的铁皮石斛多糖提取方 法，其特征在于，步骤c中石油醚旋转蒸发仪的水浴温度90℃，压力-0.1Mpa。

4.根据权利要求1所述的一种基于溶剂回收再利用的铁皮石斛多糖提取方 法，其特征在于，步骤g中水旋转蒸发仪的水浴温度60℃，压力-0.1Mpa。

5.根据权利要求1所述的一种基于溶剂回收再利用的铁皮石斛多糖提取方 法，其特征在于，步骤h中乙醇旋转蒸发仪水浴温度60℃，压力-0.1Mpa，步骤i 中乙醇旋转蒸发仪水浴温度75℃，压力-0.1Mpa。

6.根据权利要求1所述的一种基于溶剂回收再利用的铁皮石斛多糖提取方 法，其特征在于，所述sevage溶液由体积比正丁醇：氯仿＝1：4的溶液构成。

7.根据权利要求1所述的一种基于溶剂回收再利用的铁皮石斛多糖提取方 法，其特征在于，步骤n中sevage溶液旋转蒸发仪水浴温度60℃，压力-0.1Mpa， 步骤p中sevage溶液旋转蒸发仪水浴温度95℃，压力-0.1Mpa。