[发明专利]墨西哥微小杆菌2a及其应用

说明书

本发明属于利用微生物及其代谢产物提高原油采收率的三次采油技术领域，公开了一株墨西哥微小杆菌2a，其保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏号为CCTCC M 2014674。本发明还公开了墨西哥微小杆菌2a在原油或固体石蜡降解及防止石蜡结晶沉积中的应用，墨西哥微小杆菌2a对原油中胶质及沥青质的最大降解率达到72.8％及57.9％，可使原油粘度降低11.1％；可使固体石蜡在正己烷中的溶解度显著提高，可溶解石蜡量为石蜡总量的62.0％，结晶石蜡量较对照组降低64.7％，使清蜡率及防蜡率分别达77.1％及96.9％；其细胞呈高疏水性，并能较牢靠的附着在金属表面，形成生物膜，防止蜡结晶沉积。

技术领域

本发明属于利用微生物及其代谢产物提高原油采收率的三次采油技术领域，具体涉及墨西哥微小杆菌2a及其应用。

背景技术

石油是工业经济的血液，石油安全关系到一个国家经济、社会的可持续发展与国防安全。在经济全球化和区域化发展的国际环境里，世界各国均把石油资源的持续、合理及稳定获得作为国家的重要战略。

目前，通过一次及二次采油，原油采收率约为地质储量的30％左右，尚有大量的残留原油有待通过新技术进行开采。限制原油采收率提高的主要因素：一是原油中的沥青、胶质、蜡质等高分子烃粘度大，流动性差，二是原油紧密附着在储油层的多孔载体上不易流动。此外，我国原油含蜡量非常高，随着原油的开采，石蜡从地层深处向表层流动时，其随温度降低而凝结沉积在井壁及油管壁上，堵塞影响原油生产及运输。因此解除结蜡是原油生产及管道运输亟待解决的问题。

国内外常用机械清蜡、热力清防蜡及化学清蜡等。机械清蜡适用范围小，操作难度大，且设备磨损严重，使用较少；热力清蜡投入大，维护费用高，效果并不理想；化学清蜡应用较为普遍，操作简单、费用较低，但化学清蜡剂存在有毒、易燃及腐蚀设备等严重问题，对人体健康和环境保护都十分不利。

发明内容

针对现有技术中存在的问题，本发明的目的在于提供一株墨西哥微小杆菌2a及其应用，可用于对原油或石蜡的降解、防止石蜡结晶沉积，进而提升原油的采收率。

(一)一株墨西哥微小杆菌2a，分离自安塞油田、志丹油田的原油及油污土壤中，于2014年12月28日保藏于武汉市武汉大学中国典型培养物保藏中心，保藏号为CCTCC M2014674，命名为墨西哥微小杆菌2a(Exiguobacterium mexicanum 2a)。

通过PCR反应，从细菌菌株2a的16S rDNA中扩增得到1.6kb的基因片段，将PCR产物纯化后，由南京金斯瑞生物科技有限公司测序，通过与Genebank中其他菌株16S rDNA序列进行对比分析，该细菌菌株与Exiguobacterium mexicanum AM072764的16S rDNA序列同源性达到99.78％，确认该菌株为墨西哥微小杆菌(Exiguobacterium mexicanum)。

将墨西哥微小杆菌2a在牛肉膏蛋白胨培养基上培养，菌株2a菌落大而干燥，橙色，表面褶皱向上隆起，边缘不整齐；电镜下细胞呈长杆状，宽0.3～0.5μm，长1.0～2.0μm。革兰氏染色呈阳性，需氧，葡萄糖与蔗糖发酵为阳性，柠檬酸与丙二酸利用为阳性，乙醇氧化及甲基红试验呈阳性，V-P试验为阴性，硝酸盐还原试验、亚硝酸还原及反硝化试验均为阳性，脲酶试验为阴性，产氨气，能水解淀粉与明胶。

(二)墨西哥微小杆菌2a的应用

(1)在原油降解中的应用。

(2)在固体石蜡降解中的应用。

(3)在防止石蜡结晶沉积中的应用。

(4)在饱和烃降解中的应用。

(5)在芳香烃降解中的应用。

(6)在胶质降解中的应用。

(7)在沥青降解中的应用。