[发明专利]用于检测CYP2C19基因分型的引物对、荧光探针、试剂盒及方法有效
| 申请号： | 201610011520.1 | 申请日： | 2016-01-08 |
| 公开（公告）号： | CN105506118B | 公开（公告）日： | 2018-10-26 |
| 发明（设计）人： | 杨海艳;冯东;沈东艳;戈斌 | 申请（专利权）人： | 智海生物工程（北京）股份有限公司 |
| 主分类号： | C12Q1/686 | 分类号： | C12Q1/686;C12N15/11 |
| 代理公司： | 北京布瑞知识产权代理有限公司 11505 | 代理人： | 张丹 |
| 地址： | 102299 北京市昌平区科*** | 国省代码： | 北京;11 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 用于 检测 cyp2c19 基因 引物 荧光 探针 试剂盒 方法 | ||
1.一种用于检测CYP2C19基因分型的引物对及荧光探针，所述引物对包括用于扩增CYP2C19*2基因的特异性引物对和/或用于扩增CYP2C19*3基因的特异性引物对；
其中，所述用于扩增CYP2C19*2基因的特异性引物对包括一条正向引物CYP2C19*2-F和一条反向引物CYP2C19*2-R，所述正向引物CYP2C19*2-F具有序列表中SEQ ID NO：1所示的核苷酸序列，所述反向引物CYP2C19*2-R具有序列表中的SEQ ID NO：2所示的核苷酸序列；
所述用于扩增CYP2C19*3基因的特异性引物对包括一条正向引物CYP2C19*3-F和一条反向引物CYP2C19*3-R，所述正向引物CYP2C19*3-F具有序列表中SEQ ID NO：3所示的核苷酸序列，所述反向引物CYP2C19*3-R具有序列表中的SEQ ID NO：4所示的核苷酸序列；
所述荧光探针包括用于检测CYP2C19*2基因的荧光探针CYP2C19*2-P和/或用于检测CYP2C19*3基因的荧光探针CYP2C19*3-P；
其中，所述荧光探针CYP2C19*2-P具有序列表中的SEQ ID NO：5所示的核苷酸序列；
所述荧光探针CYP2C19*3-P具有序列表中的SEQ ID NO：6所示的核苷酸序列；
所述荧光探针为在5′末端区域具有荧光基团，在3′末端区域具有淬灭基团的双标记探针。
2.如权利要求1所述的引物对及荧光探针，其特征在于：当所述荧光探针同时包括用于检测CYP2C19*2基因的荧光探针CYP2C19*2-P和用于检测CYP2C19*3基因的荧光探针CYP2C19*3-P时，5′末端区域具有不同的荧光基团。
3.一种用于检测CYP2C19基因分型的试剂盒，所述试剂盒包括如权利要求1或2所述引物对及荧光探针。
4.如权利要求3所述的试剂盒，其特征在于：所述试剂盒还包括PCR缓冲液、阴性对照品、阳性对照品、核酸DNA提取试剂、PCR反应所需的Taq聚合酶、dNTP中的一种或多种。
5.一种用于检测CYP2C19基因分型的PCR试剂，所述PCR试剂包括如权利要求1或2所述的引物对及荧光探针以及PCR缓冲液。
6.如权利要求5所述的PCR试剂，其特征在于：所述引物对中各引物和所述探针在PCR试剂中的浓度为：正向引物CYP2C19*2-F和/或正向引物CYP2C19*3-F的终浓度为0.08-0.15μM，反向引物CYP2C19*2-R和/或反向引物CYP2C19*3-R的终浓度为0.72-1.55μM，荧光探针CYP2C19*2-P和/或荧光探针CYP2C19*3-P的终浓度为0.12-0.25μM。
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