[发明专利]Cu纳米材料的制备方法及癌细胞检测方法有效
申请号: | 201610004429.7 | 申请日: | 2016-01-06 |
公开(公告)号: | CN105478754B | 公开(公告)日: | 2017-12-26 |
发明(设计)人: | 肖正华 | 申请(专利权)人: | 重庆医科大学附属永川医院 |
主分类号: | B22F1/02 | 分类号: | B22F1/02;C23C18/18;C23C18/36;G01N33/574 |
代理公司: | 广州市华学知识产权代理有限公司44245 | 代理人: | 杨燕珠 |
地址: | 402160 *** | 国省代码: | 重庆;85 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | cu 纳米 材料 制备 方法 癌细胞 检测 | ||
1.Cu纳米材料的制备方法,其特征在于,包括以下步骤:
利用直接沉积法制备棒状ZnO;
将Ni镀在ZnO上,得到镀镍的ZnO;
用Cu包覆镀镍的ZnO,即得到Cu包覆的镀镍ZnO纳米材料;
采用透明质酸对Cu包覆的镀镍ZnO纳米材料进行修饰,其包括以下步骤:将透明质酸与缓冲液置于水浴中搅拌,使透明质酸分散于缓冲液后再加入Cu包覆的镀镍ZnO,持续搅拌,采用超滤管除去多余的透明质酸,从而得到透明质酸修饰的Cu包覆的镀镍ZnO纳米材料。
2.根据权利要求1所述的Cu纳米材料的制备方法,其特征在于,所述将Ni镀在ZnO上,其包括以下步骤:将ZnO在二氯化锡和盐酸的溶液中敏化,再放入到二氯化钯和盐酸溶液中活化,活化后的ZnO用去离子水清洗,然后再将ZnO放入到含有硫酸镍、次磷酸钠、氯化铵、柠檬酸钠、丁二酸和乳酸的化学镀池中进行化学镀,最后将镀过镍的ZnO过滤并用去离子水洗涤并烘干,即得到镀镍的ZnO。
3.根据权利要求1所述的Cu纳米材料的制备方法,其特征在于,所述用Cu包覆镀镍的ZnO,其包括以下步骤:将制备的镀镍ZnO移入去离子水中,加入聚乙二醇,在超声条件下分散得到镀镍ZnO的悬浊液;将氧化亚铜粉末移入去离子水中充分溶解,得到氧化亚铜悬浊液;将氧化亚铜悬浊液与镀镍ZnO悬浊液混合,经过静置、过滤、水洗、醇洗后烘干,即得到Cu包覆的镀镍ZnO纳米材料。
4.一种癌细胞检测方法,其特征在于,使用了如权利要求1-3任意一项所述的Cu纳米材料的制备方法制备出的Cu纳米材料,包括以下步骤:
a)荧光素标记,将Cu纳米材料溶解在去离子水中,加入异硫氰酸荧光素进行标记;
b)癌细胞的培养,将传代后达到80%~90%汇合的癌细胞,接种于孔板,孵化24h后,用碱性磷酸盐溶液洗涤,加入异硫氰酸荧光素标记的Cu纳米材料的溶液,并采用多聚甲醛溶液固定后,用碱性磷酸盐溶液洗涤,加入等量的2%亚铁氰化钾溶液和2%氯化氢混合液后静置,避光孵化18~30min,洗去染色液,核固红复染,去除上清液,用碱性磷酸盐溶液再次洗涤;采用乙醇梯度脱水,二甲苯透明2次,每次10~15min;中性树胶封片,置于激光显微镜下观察,肿瘤细胞的细胞膜及细胞质有阳性荧光染色,可根据染色数量定量检测出癌细胞的数量。
5.如权利要求4所述癌细胞检测方法,其特征在于:所述Cu纳米材料的粒径范围为40-60nm,透明质酸在Cu包覆的镀镍ZnO纳米材料表面的载量为0.4-0.5mmol/g。
6.如权利要求4所述癌细胞检测方法,其特征在于:所述癌细胞为肺癌细胞、肝癌细胞、乳腺癌细胞或胃癌细胞中的一种。
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