[发明专利]重组细胞、重组细胞的制造方法以及1;4-丁二醇的生产方法

权利要求书

1.一种重组细胞，其专性厌氧性且具有生成乙酸的能力，其中，

所述重组细胞具有编码选自琥珀酸半醛脱氢酶、琥珀酰CoA合成酶、CoA依赖型琥珀酸半醛脱氢酶、4-羟基丁酸脱氢酶、4-羟基丁酸CoA转移酶、4-羟基丁酸CoA还原酶、4-羟基丁醛脱氢酶、以及醇脱氢酶中的至少1种酶的基因，

该基因表达，

所述重组细胞能够生产1,4-丁二醇。

2.一种重组细胞，其专性厌氧性且具有生成乙酸的能力，其中，

所述重组细胞具有编码选自2-酮戊二酸脱羧酶、4-羟基丁酸脱氢酶、4-羟基丁酸CoA转移酶、4-羟基丁酸CoA还原酶、4-羟基丁基醛脱氢酶、以及醇脱氢酶中的至少1种酶的基因，

该基因表达，

所述重组细胞能够生产1,4-丁二醇。

3.如权利要求1或2所述的重组细胞，其具有由甲基四氢叶酸、一氧化碳以及CoA合成乙酰CoA的功能，

所述重组细胞能够由选自一氧化碳、二氧化碳、甲酸以及甲醇中的至少1种C1化合物生产1,4-丁二醇。

4.如权利要求1～3中任一项所述的重组细胞，其具有一氧化碳脱氢酶。

5.如权利要求1～4中任一项所述的重组细胞，其为梭菌(Clostridium)属细菌、穆尔氏菌(Moorella)属细菌、或醋杆状菌(Acetobacterium)属细菌。

6.如权利要求1或2所述的重组细胞，其具有纤维素同化性，

所述重组细胞能够由木质纤维素、纤维素、或可溶性碳水化合物生产1,4-丁二醇。

7.如权利要求1、2或6所述的重组细胞，其生产多纤维素酶体。

8.如权利要求7所述的重组细胞，其为梭菌(Clostridium)属细菌。

9.如权利要求8所述的重组细胞，其为热解纤维梭菌(Clostridium thermocellum)、解纤维素梭菌(Clostridium cellulolyticum)、或噬纤维梭菌(Clostridiumcellulovorans)。

10.如权利要求1～9中任一项所述的重组细胞，其中，

所述基因的至少之一为源自细菌的基因。

11.如权利要求1～10中任一项所述的重组细胞，其中，

所述基因的至少之一为源自宿主细胞的基因。

12.如权利要求1～11中任一项所述的重组细胞，其中，

所述基因被编入基因组。

13.如权利要求1～12中任一项所述的重组细胞，其具有对至少400mM的1,4-丁二醇的耐性。

14.如权利要求1～13中任一项所述的重组细胞，其中，

所述重组细胞的乙醇合成能力被控制为低于宿主细胞的乙醇合成能力。

15.如权利要求1～14中任一项所述的重组细胞，其中，

所述重组细胞的2,3-丁二醇合成能力被控制为低于宿主细胞的2,3-丁二醇合成能力。

16.一种重组细胞的制造方法，其制造重组细胞，该方法包括：

第一工序，提供专性厌氧性且具有生成乙酸的能力的宿主细胞；以及

第二工序，向所述宿主细胞中导入编码选自琥珀酸半醛脱氢酶、琥珀酰CoA合成酶、CoA依赖型琥珀酸半醛脱氢酶、4-羟基丁酸脱氢酶、4-羟基丁酸CoA转移酶、4-羟基丁酸CoA还原酶、4-羟基丁醛脱氢酶、及醇脱氢酶中的至少一种酶的基因，

该基因表达，

所述重组细胞能够生产1,4-丁二醇。