[发明专利]能够在人脂肪衍生的干细胞和肝细胞中抑制丙肝病毒复制的肽及其衍生物

说明书

本发明提供了具有序列DEAQETAVSSHEQD的肽(兔α1‑抗蛋白酶F的片段)及其衍生物DEAQETAVSSHEQ和QETACSSHEQD，其在hADSC和人肝细胞中显著抑制血清携带的HCV复制。

发明领域

本发明涉及能够抑制丙肝病毒复制的肽及其衍生物、其编码多肽、载体、宿主细胞以及包含所述肽的药物组合物以及它们的用途。

发明背景

HCV为黄病毒科(Flaviviridae)的包膜正链RNA病毒。它含有9.6kb基因组，其始于非翻译区(5’-UTR)，接着是编码结构蛋白(core、E1和E2)和包括p7、NS2、NS3、NS4A和4B、NS5A和5B在内的非结构(NS)蛋白的序列(关于综述，参见参考文献¹)。至少1亿7千万的人被HCV长期感染，导致每年超过350,000人死亡²。现行治疗例如PEG-干扰素和抗病毒药利巴韦林的组合使用具有许多副作用，并且仅在部分感染患者中有效。已严谨地尝试新的抗HCV治疗的开发(关于综述，参见参考文献³)，然而对于该开发，缺乏可靠和生理学的细胞培养系统来生长血清携带的HCV(HCVser)仍然是一个障碍。例如，HCVser的直接感染仅在原代人和黑猩猩肝细胞中显示，并且感染是瞬时且低效的⁴。最近设计的体外基于细胞的培养方法利用HCV基因组的分子克隆，而非天然病毒(关于综述，参见参考文献⁵)。此外，这些模型在非原代人细胞例如肝癌细胞系⁶或神经上皮细胞系⁷中繁殖HCV。因此，关于将结果外推至临床病毒-宿主相互作用存在忧虑。动物模型例如黑猩猩、人-肝嵌合小鼠⁸或遗传修饰成易感于HCV感染的小鼠⁹难以获得或建立。为克服此，在共同待审申请(PCT/CN2015/070243)中，我们成功地开发了一个平台，其中人脂肪衍生的干细胞(hADSC)的亚类支持血清源HCV基因型1a、1b、2a、2b和混合的2a+2b的完全复制。此外，新产生的病毒对于幼稚hADSC具有感染性，并且对幼稚hADSC的系列“再感染”保持病毒复制并且总病毒滴度在6个再感染循环后可逐步放大至超过1x10¹¹个拷贝。有重大意义的是，由血清携带的HCV感染的hADSC产生的病毒对原代人肝细胞具有感染性。

仍对具有较少的副作用的有效药物和治疗存在需求。最近已在设计小分子作为新一代的抗HCV治疗方面作出了进步，然而产生这些HCV特异性酶抑制剂是昂贵的。此外，其长期不利作用要求进一步监测。因而仍需要开发新的抗HCV疗法，其由天然产物组成或来源于天然产物，会令人信服地导致更安全的特征，并且具有较低的生产成本。

发明概述

提供本概述以呈现本发明的概述，从而简要地指出本发明的性质和实质。在理解其不用于解释或限制权利要求的范围或含义的情况下提出该概述。

在一方面，本公开内容提供用于在受试者中治疗或预防HCV感染或抑制HCV复制的方法，其中所述方法包括给予所述受试者有效量的肽或其变体、衍生物、突变体或片段，所述肽包含具有与氨基酸序列DEAQETAVSSHEQD具有至少70％同一性的氨基酸序列。在一些实施方案中，所述肽的氨基酸序列具有与氨基酸序列DEAQETAVSSHEQD具有至少75％、80％、85％、90％、95％、98％或99％或更多同一性的氨基酸序列。在一些实施方案中，所述肽包含氨基酸序列DEAQETAVSSHEQD、QETAVSSHEQD或DEAQETAVSSHEQ。在一些实施方案中，所述肽的序列基本上由或由DEAQETAVSSHEQD、QETAVSSHEQD或DEAQETAVSSHEQ组成。在一些实施方案中，所述肽包含至少一个氨基酸添加、缺失和/或取代。在一些实施方案中，所述氨基酸添加、缺失和/或取代在C端和/或N端进行。在一些实施方案中，所述肽具有1-5、优选1-3个氨基酸添加、缺失和/或取代。在一些实施方案中，所述方法进一步包含给予另一种抗HCV剂。这种抗HCV剂可在本发明肽之前、之后或与之同时给予。在一些实施方案中，HCV具有基因型1a、1b、2a或2b或基因型3或基因型4。