[发明专利]被工程化为治疗与高氨血症相关的疾病的细菌

权利要求书

1.一种遗传工程化的细菌，所述遗传工程化的细菌包含精氨酸调节子，

其中所述细菌包含编码具有在相同条件下与来自相同细菌亚型的野生型N-乙酰谷氨酸合成酶相比降低的精氨酸反馈抑制的功能性N-乙酰谷氨酸合成酶的基因，其中精氨酸反馈抗性N-乙酰谷氨酸合成酶基因由选自以下的DNA序列组成：

a)SEQ ID NO:28，以及

b)除了冗余的遗传密码以外，编码与由SEQ ID NO:28编码的多肽相同的多肽的DNA序列；

其中编码精氨酸反馈抗性N-乙酰谷氨酸合成酶的所述基因的表达由被见于哺乳动物消化道中的低氧或厌氧条件诱导的启动子控制，所述启动子选自富马酸盐和硝酸盐还原酶调节物(FNR)启动子、异化硝酸盐呼吸调节物(DNR)启动子以及精氨酸脱亚氨酶和硝酸盐还原(ANR)启动子；并且

其中通常存在于相应的野生型细菌中的功能性argR基因的每个拷贝已被独立地缺失或已通过一个或更多个核苷酸缺失、插入或取代被独立地失活。

2.根据权利要求1所述的遗传工程化的细菌，其中通常存在于相应的野生型细菌中的功能性argG基因的每个拷贝已被独立地缺失或已通过一个或更多个核苷酸缺失、插入或取代被独立地失活。

3.根据权利要求1所述的遗传工程化的细菌，其中所述启动子是FNR启动子。

4.根据权利要求2所述的遗传工程化的细菌，其中所述启动子是FNR启动子。

5.根据权利要求1-4中任一项所述的遗传工程化的细菌，其中编码所述精氨酸反馈抗性N-乙酰谷氨酸合成酶的所述基因存在于所述遗传工程化的细菌中的质粒上。

6.根据权利要求5所述的遗传工程化的细菌，其中编码所述精氨酸反馈抗性N-乙酰谷氨酸合成酶的所述基因在所述质粒上被可操作地连接至在低氧或厌氧条件下被诱导的启动子。

7.根据权利要求1-4中任一项所述的遗传工程化的细菌，其中编码所述精氨酸反馈抗性N-乙酰谷氨酸合成酶的所述基因存在于所述遗传工程化的细菌的染色体中。

8.根据权利要求7所述的遗传工程化的细菌，其中编码所述精氨酸反馈抗性N-乙酰谷氨酸合成酶的所述基因在所述染色体中被可操作地连接至在低氧或厌氧条件下被诱导的启动子。

9.根据权利要求1-4、6和8中任一项所述的遗传工程化的细菌，其中所述遗传工程化的细菌是thyA或dapB营养缺陷型。

10.根据权利要求5所述的遗传工程化的细菌，其中所述遗传工程化的细菌是thyA或dapB营养缺陷型。

11.根据权利要求7所述的遗传工程化的细菌，其中所述遗传工程化的细菌是thyA或dapB营养缺陷型。

12.根据权利要求1-4、6、8和10-11中任一项所述的遗传工程化的细菌，其中编码所述精氨酸反馈抗性N-乙酰谷氨酸合成酶的所述基因存在于所述遗传工程化的细菌的染色体中，并且在所述染色体中被可操作地连接至在低氧或厌氧条件下被诱导的启动子；且其中所述遗传工程化的细菌是thyA营养缺陷型。

13.根据权利要求5所述的遗传工程化的细菌，其中编码所述精氨酸反馈抗性N-乙酰谷氨酸合成酶的所述基因存在于所述遗传工程化的细菌的染色体中，并且在所述染色体中被可操作地连接至在低氧或厌氧条件下被诱导的启动子；且其中所述遗传工程化的细菌是thyA营养缺陷型。

14.根据权利要求7所述的遗传工程化的细菌，其中编码所述精氨酸反馈抗性N-乙酰谷氨酸合成酶的所述基因存在于所述遗传工程化的细菌的染色体中，并且在所述染色体中被可操作地连接至在低氧或厌氧条件下被诱导的启动子；且其中所述遗传工程化的细菌是thyA营养缺陷型。