[发明专利]自然杀伤细胞的方法和组合物

权利要求书

1.一种用于增加NK细胞数目的方法，包括：

使至少一个NK细胞离体地或在体外与至少一种刺激NK细胞的外来体接触，所述至少一种刺激NK细胞的外来体包括存在于外来体膜中的至少两种NK细胞刺激肽，其中所述NK细胞刺激肽中的至少一种包含4-1BB配体(4-1BBL)或白介素-21(IL-21)，并且其中所述刺激NK细胞的外来体是选自以下的工程化的外来体分泌细胞系的细胞外产物：K562-mb15-41BBL、K562-mb21-41-BBL以及K562-mb15-41BBL或K562-mb21-41-BBL的衍生物。

2.根据权利要求1所述的方法，其中至少一种NK细胞刺激肽选自由以下项组成的组：IL-2、IL-12、IL-18、MICA/B、ULBP2、ICAM-1、2B4、BCM1/SLAMF2、CD155、CD112、CCR7、DAP12和DAP10。

3.根据权利要求1或权利要求2所述的方法，其中所述NK细胞刺激肽与膜插入肽偶联。

4.根据权利要求3所述的方法，其中所述膜插入肽包括能够进行膜插入、对脂质双层具有亲和力的融合肽，并且其中所述融合肽包括IgG的区段、CD4的区段、或它们的组合。

5.根据权利要求3所述的方法，其中与膜插入肽偶联的所述一种或多种NK细胞刺激肽是由重组DNA编码的融合蛋白。

6.根据权利要求3所述的方法，其中所述膜插入肽包括人Fc、GPI、跨膜T细胞受体或pHLIP。

7.根据权利要求1所述的方法，其中所述NK细胞存在于外周血单核细胞(PBMC)群体中。

8.根据权利要求1所述的方法，其中所述工程化的外来体分泌细胞系经工程化以改善外来体的表达。

9.NK细胞和刺激NK细胞的外来体在制备用于同种异体移植、单倍体相合移植或用于治疗癌症或病毒感染的体内免疫疗法的组合物中的用途，其中刺激NK细胞的外来体包括存在于外来体膜中的至少两种NK细胞刺激肽，所述NK细胞刺激肽中的至少一种包含4-1BB配体(4-1BBL)或白介素-21(IL-21)，并且所述刺激NK细胞的外来体是选自以下的工程化的外来体分泌细胞系的细胞外产物：K562-mb15-41BBL、K562-mb21-41-BBL以及K562-mb15-41BBL或K562-mb21-41-BBL的衍生物。

10.根据权利要求9所述的用途，其用于治疗癌症，其中所述用途不会引起移植物抗宿主病(GVHD)。

11.根据权利要求9所述的用途，其用于治疗病毒感染。

12.根据权利要求10所述的用途，其用于治疗癌症，所述癌症选自AML、乳腺癌、膀胱癌、结肠直肠癌、肾癌、肺癌、前列腺癌、甲状腺癌和子宫癌。

13.通过权利要求1所述的方法刺激的NK细胞在制备用于治疗癌症的组合物中的用途，其中所述用途降低干细胞移植后的癌症复发风险。

14.一种用于产生工程化的刺激NK细胞的外来体的方法，包括在外来体的膜中包埋至少两种NK细胞刺激肽，其中所述NK细胞刺激肽中的至少一种包含4-1BB配体(4-1BBL)或白介素-21(IL-21)，并且其中所述外来体是选自以下的工程化的外来体分泌细胞系的细胞外产物：K562-mb15-41BBL、K562-mb21-41-BBL以及K562-mb15-41BBL或K562-mb21-41-BBL的衍生物。