[发明专利]使用土壤杆菌属细菌向高粱属植物导入基因的方法及高粱属植物的转化植物的制备方法有效
| 申请号： | 201580070896.3 | 申请日： | 2015-12-24 |
| 公开（公告）号： | CN107105623B | 公开（公告）日： | 2021-06-15 |
| 发明（设计）人： | 纲岛雅子 | 申请（专利权）人： | 株式会社钟化 |
| 主分类号： | C12N15/09 | 分类号： | C12N15/09;A01H1/00 |
| 代理公司： | 北京市柳沈律师事务所 11105 | 代理人： | 沈雪 |
| 地址： | 日本*** | 国省代码： | 暂无信息 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 使用 土壤 杆菌 细菌 高粱 植物 导入 基因 方法 转化 制备 | ||
1.一种对高粱属植物的植物材料的组织进行基因导入的方法，其特征在于，包括：
(i)制备所述植物材料的工序；
(ii)将土壤杆菌属细菌接种于该植物材料的组织的工序；以及
(iii)将该接种了土壤杆菌属细菌的组织在该土壤杆菌属细菌存在下进行培养的共存工序；
至少在所述(iii)工序中，以1倍浓度-1/5浓度的LS培养基为基本培养基，使用提高了镁离子浓度的培养基，
所述LS培养基含有1.5mM的镁离子、20.0mM的钾离子、3.0mM的钙离子，
所述提高了镁离子浓度的培养基的镁离子浓度为4.0mM以上且100mM以下。
2.一种对高粱属植物的植物材料的组织进行基因导入的方法，其特征在于，包括：
(i)制备所述植物材料的工序；
(ii)将土壤杆菌属细菌接种于该植物材料的组织的工序；以及
(iii)将该接种了土壤杆菌属细菌的组织在该土壤杆菌属细菌存在下进行培养的共存工序；
至少在所述(iii)工序中，以1倍浓度-1/5浓度的LS培养基为基本培养基，使用提高了氮源和镁离子的浓度的培养基，
所述LS培养基含有1.5mM的镁离子、20.0mM的钾离子、3.0mM的钙离子，
所述提高了氮源和镁离子的浓度的培养基的NH4+和NO3-的总浓度为60mM以上且270mM以下，镁离子浓度为2.6mM以上且100mM以下。
3.一种对高粱属植物的植物材料的组织进行基因导入的方法，其特征在于，包括：
(i)制备所述植物材料的工序；
(ii)将土壤杆菌属细菌接种于该植物材料的组织的工序；以及
(iii)将该接种了土壤杆菌属细菌的组织在该土壤杆菌属细菌存在下进行培养的共存工序；
至少在所述(iii)工序中，以1倍浓度-1/5浓度的LS培养基为基本培养基，使用提高了氮源和钾离子的浓度的培养基，
所述LS培养基含有1.5mM的镁离子、20.0mM的钾离子、3.0mM的钙离子，
所述提高了氮源和钾离子的浓度的培养基的NH4+和NO3-的总浓度为60mM以上且270mM以下，钾离子浓度为24mM以上且65mM以下。
4.一种对高粱属植物的植物材料的组织进行基因导入的方法，其特征在于，包括：
(i)制备所述植物材料的工序；
(ii)将土壤杆菌属细菌接种于该植物材料的组织的工序；以及
(iii)将该接种了土壤杆菌属细菌的组织在该土壤杆菌属细菌存在下进行培养的共存工序；
至少在所述(iii)工序中，以1倍浓度-1/5浓度的LS培养基为基本培养基，使用提高了氮源和钙离子的浓度的培养基，
所述LS培养基含有1.5mM的镁离子、20.0mM的钾离子、3.0mM的钙离子，
所述提高了氮源和钙离子的浓度的培养基的NH4+和NO3-的总浓度为60mM以上且270mM以下，钙离子浓度为5.2mM以上且10mM以下。
5.一种对高粱属植物的植物材料的组织进行基因导入的方法，其特征在于，包括：
(i)制备所述植物材料的工序；
(ii)将土壤杆菌属细菌接种于该植物材料的组织的工序；以及
(iii)将该接种了土壤杆菌属细菌的组织在该土壤杆菌属细菌存在下进行培养的共存工序；
至少在所述(iii)工序中，以1倍浓度-1/5浓度的LS培养基为基本培养基，使用提高了氮源和钠离子的浓度的培养基，
所述LS培养基含有1.5mM的镁离子、20.0mM的钾离子、3.0mM的钙离子，
所述提高了氮源和钠离子的浓度的培养基的NH4+和NO3-的总浓度为60mM以上且270mM以下，钠离子浓度为0.6mM以上且200mM以下。
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