[发明专利]从消毒处理容器一体化连续分离流体流

说明书

本发明提供分离方法和相关硬件以允许从包括无菌过程的灭菌系统(sterilized system)(例如，无菌处理容器)分离流体流。本文描述的分离方法允许从灭菌系统(例如，生物制造系统)连续移出流体流(例如，废料流，含有重组治疗性蛋白的液体)，其提供对该灭菌系统较少的手动操作且降低污染该灭菌系统的风险。

相关申请的交叉引用

本申请要求保护2014年10月24日提交的美国临时专利申请系列号62/068,181的优先权，其整体内容在本文通过提述并入。

技术领域

本发明涉及重组蛋白的生物技术和生物制造方法。

发明背景

含有编码重组蛋白的核酸的哺乳动物细胞通常用于生产治疗上或商业上重要的蛋白质。在当前多样化产品线的环境中，生物技术公司越来越多地受到驱动去开发创新的解决方案用于高度灵活且成本有效地制造治疗剂(例如，治疗蛋白药物物质)。

在连续生物制造过程中，通常有必要从无菌过程容器(sterile process vessel)去除流体。这种流体的去除基于一些预定的触发方式可以是连续流或间歇流。去除需要以一种保护从其中去除流体的容器的无菌性的方式来进行。当流体流有促进生物生长的潜力(其最终能够长回无菌过程容器)时，这在生物制造中可能是富于挑战的。如今使用的主流方法是分批传输方法，其中在第二无菌容器中收集废料流，并且当该容器达到容量时，再将其与无菌过程容器断开，然后丢弃废料。但这并不理想，因为这是分批的过程(非连续的)，并且要花费许多时间操作和灭菌容器。如果任何步骤失败的话，这些操作还创造了过程的风险。或者，相同的过程也可以使用预灭菌袋来完成，然而袋的成本可能阻碍进行连续过程，并且袋的使用并没有消除过程中的风险。

发明概述

本发明部分基于开发了分离过程和相关硬件以允许从含有无菌过程的灭菌系统(sterilized system)(例如，无菌处理容器(sterile process vessel))周期性或连续地分离(例如，去除)流体流。所述分离过程利用分离容器来将无菌过程与环境和废料流分开。分离容器仅部分填充且保留了容器内的顶部空间，其中所述顶部空间含有灭菌剂。所述灭菌剂(例如，灭菌气体(例如，含有臭氧、环氧乙烷、二氧化氮或汽化过氧化氢的气体))可以喷射入所述容器或直接引入所述容器的顶部空间。所述灭菌剂保持了所述容器的顶部空间内的灭菌环境(sterilizing atmosphere)，其提供了在输入无菌工艺流和输出流体流(例如，废料流)之间的分离。在容器的顶部空间内灭菌剂(例如，灭菌气体)的浓度受到控制，以提供必要的灭菌环境。

在一方面中，本发明提供抑制灭菌系统污染的方法，所述方法包括提供一种系统，其包括第一容器，其中所述第一容器包含液体；使第一体积的所述液体流出所述第一容器，并通过一定体积的灭菌气体且流入第二容器。本发明考虑的灭菌系统包括但不限于生物制造系统和药物制造系统。所述第一容器是灭菌的容器。在示例性的实施方案中，所述第一容器包括生物制造系统的部件。例如，所述第一容器可以是(例如，本文描述的或本领域已知的任何示例性生物反应器)：层析系统(chromatography system)的一个或多个部件(例如，层析柱)，微滤系统的一个或多个部件，或超滤/渗滤(UF/DF)系统的一个或多个部件。对于生物制造系统，第一容器的液体可以是液体培养基和/或包含重组治疗性蛋白的液体。在一些实施方案中，第一容器的液体包含含有重组治疗性蛋白的细胞。重组治疗性蛋白可以是从细胞分泌的蛋白质或不从细胞分泌的蛋白质。

在一些方面中，灭菌气体选自下组：臭氧、环氧乙烷、二氧化氮或汽化过氧化氢(例如，含有臭氧的气体，含有环氧乙烷的气体，含有氮氧化物(nitrogen oxide)的气体，和含有过氧化氢的气体)。