[发明专利]用于细胞转染和蛋白生产的新型选择性标记物

权利要求书

1.一种中国仓鼠卵巢(CHO)细胞系，其包含表达载体，所述表达载体包含编码哺乳动物二氢乳清酸脱氢酶(DHODH)的核苷酸序列和至少一个用于表达重组蛋白的表达盒，其中所述DHODH由SEQ ID NO: 2的序列或SEQ ID NO: 4的序列组成，其中所述DHODH对至少一种DHODH抑制剂敏感。

2.根据权利要求1的中国仓鼠卵巢(CHO)细胞系，其中所述核苷酸序列由SEQ ID NO: 1的序列或SEQ ID NO: 3的序列组成。

3.根据权利要求1或2的中国仓鼠卵巢(CHO)细胞系，其中所述重组蛋白是单克隆抗体。

4.根据权利要求或2的中国仓鼠卵巢(CHO)细胞系，其中所述载体包含适于抗体轻链克隆的第一表达盒和适于抗体重链克隆的第二表达盒。

5.根据权利要求1或2的中国仓鼠卵巢(CHO)细胞系，其中所述DHODH对特立氟胺敏感。

6.包含根据权利要求1-5任一项的CHO细胞系的表达系统。

7.根据权利要求6的表达系统，其进一步包含至少一种DHODH抑制剂。

8.根据权利要求7的表达系统，其中所述至少一种DHODH抑制剂是特立氟胺。

9.根据权利要求6-8任一项的表达系统，其中由包含在所述表达载体中的编码DHODH的核苷酸序列编码的DHODH不是仓鼠DHODH。

10.一种试剂盒，其包含根据权利要求1-5任一项的CHO细胞系和至少一种DHODH抑制剂。

11.根据权利要求10的试剂盒，其中所述至少一种DHODH抑制剂是特立氟胺。

12.体外生产重组蛋白的方法，其包括步骤：

a) 提供根据权利要求1-5任一项的CHO细胞系；

b) 在适于生产所述重组蛋白的条件下培养获得的所述CHO细胞系；和

c) 分离和/或纯化所述重组蛋白。

13.根据权利要求12的方法，其中在至少一种DHODH抑制剂存在下实施步骤(b)。

14.根据权利要求13的方法，其中所述至少一种DHODH抑制剂是特立氟胺。

15.一种生产药物组合物的方法，所述方法包括根据权利要求12-14任一项的方法，其中将步骤c)获得的所述重组蛋白配制成为药物组合物。

16.权利要求1-5任一项的CHO细胞系、根据权利要求6-9任一项的表达系统或根据权利要求10或11的试剂盒用于生产重组蛋白的用途。

17.根据权利要求16的用途，其中所述CHO细胞系、所述表达系统或所述试剂盒与至少一种DHODH抑制剂组合使用。

18.根据权利要求17的用途，其中所述至少一种DHODH抑制剂是特立氟胺。

19.如权利要求1定义的编码DHODH的核苷酸序列作为用于分离生产重组蛋白的克隆的选择性标记物的用途。

20.根据权利要求19的用途，其中所述编码DHODH的核苷酸序列与至少一种DHODH抑制剂组合使用。

21.根据权利要求20的用途，其中所述至少一种DHODH抑制剂是特立氟胺。