[发明专利]通过将酶固定化到官能化支持物上在水中降解和失活抗生素的方法

权利要求书

1.用于降解和失活至少一种生物异源物质(xenobiotic)的方法，所述至少一种生物异源物质存在于水性介质中，其包括以下步骤：

a.将至少一种酶移植到固体支持物上，

b.将具有所述至少一种酶的所述固体支持物温育到所述水性介质中，并且

c.测量所述至少一种生物异源物质的浓度的演变，

其中所述至少一种酶是New-Dehli金属-β-内酰胺酶1(New-Dehli metallo-β-lactamase 1)，和任选地选自从糙皮侧耳菌(Pleurotus ostreatus)提取的漆酶和从铜绿假单胞菌(Pseudomonas aeruginosa)提取的β-内酰胺酶中的一种或两种酶，并且其中所述固体支持物是移动床载体。

2.根据权利要求1的方法，其特征在于所述移动床载体在高密度聚乙烯中。

3.根据权利要求1或2中任一项的方法，其特征在于所述移动床载体是Kaldnes生物芯片。

4.根据权利要求1的方法，其特征在于所述移动床载体在至少一种酶的所述移植之前用至少一种前体活化。

5.根据权利要求4的方法，其特征在于所述活化步骤通过在大气压下通过冷等离子体沉积(cold plasma deposition)或通过涂覆用所述至少一种前体表面处理所述移动床载体进行。

6.根据权利要求5的方法，所述涂覆为自动-聚合过程。

7.根据权利要求4-6中任一项的方法，其特征在于所述至少一种前体是聚甲基丙烯酸缩水甘油酯(polyglycidyl methacrylate)、多巴胺、马来酸酐(maleic anhydride)和乙烯基三甲氧基硅烷(vinyltrimethoxysilane)，或多巴胺丙烯酰胺(dopamine acrylamide)和乙烯基三甲氧基硅烷。

8.根据权利要求7的方法，所述至少一种前体是聚甲基丙烯酸缩水甘油酯或多巴胺。

9.根据权利要求1的方法，其特征在于所述方法还包括在将所述至少一种酶移植到所述固体支持物上之后通过微生物抗粘附层(anti-adhesion layer)饱和所述固体支持物的步骤。

10.根据权利要求9的方法，其特征在于所述微生物抗粘附层包含吐温20。

11.根据权利要求1的方法，其特征在于以纯化形式选择所述至少一种酶。

12.根据权利要求1的方法，其特征在于所述温育步骤在室温和搅拌下进行。

13.根据权利要求12的方法，以30rpm进行所述搅拌。

14.根据权利要求12的方法，以50rpm进行所述搅拌。

15.根据权利要求12的方法，以100rpm进行所述搅拌。

16.根据权利要求12的方法，以200rpm进行所述搅拌。

17.根据权利要求12的方法，以300rpm进行所述搅拌。

18.根据权利要求1的方法，其特征在于所述测量所述至少一种生物异源物质浓度的演变的步骤通过紫外线吸光度测量，或通过液相色谱(liquid chromatography)和串联质谱法(tandem mass spectrometry)进行。

19.根据权利要求1的方法，其特征在于所述至少一种生物异源物质是至少一种抗生素。