[发明专利]用于测定流体样品中的凝固的传感器

说明书

本发明涉及包括微环境传感器的分析试验装置和用于测定施加于所述微环境传感器的流体样品中的凝固的方法，且具体地，涉及在单个现场护理组合试验筒中使用一个或多个微环境传感器进行一类或多类凝固测定。例如，本发明可能涉及包括至少一个用聚合物层包被的转换器的试验传感器。所述聚合物层包含具有可检测部分的、凝血酶可切割的肽。

优先权声明

本申请要求2014年9月26日提交的美国临时申请号62/055,768、 2014年9月26日提交的美国临时申请号62/055,772、和2014年9月 26日提交的美国临时申请号62/055,780的优先权，它们的整个内容通过引用并入本文。

技术领域

本发明涉及包含微环境传感器的分析试验装置和用于测定施加于所述微环境传感器的流体样品中的凝固的方法，且具体地，涉及在现场护理试验筒(point of care testcartridge)中使用微环境传感器进行凝固测定。

背景技术

血液凝固或止血是身体的一种重要保护机制，用于封闭由对身体的损伤造成的创伤。止血以两个阶段发生。初步(细胞的)止血用于快速地停止出血和使失血最小化。初步止血涉及内皮的受损细胞和下面的细胞层，其发出信号使血小板(凝血细胞)能够积累在受损血管区域中，从而形成暂时封闭创伤的栓。次级(血浆的)止血或凝固与初步止血同时开始，并涉及使血液凝固的过程。更具体地，凝固由信号传递凝固级联控制，所述信号传递凝固级联由13种相互作用并相互活化的凝固因子组成。在凝固级联结束时，纤维蛋白原被转化成纤维蛋白。纤维蛋白纤维的网络会补强创伤闭合，且血小板和其它血细胞被捕获在该网络中并形成血块(血栓)。最后，血小板和内皮释放生长因子控制创伤-愈合过程。在这些过程结束时，纤维蛋白网络被血浆中的酶溶解。

止血需要促凝血和抗凝血的微妙平衡，使得循环血液保持相对低粘度流体且凝固仅仅为了封闭创伤而开始。促凝血通过封闭来自创伤或受损血管的血流而阻止过度出血，而抗凝血阻止血块在循环系统中形成，所述血块否则会阻塞血管并导致心肌梗塞或中风。

次级止血的凝固级联是基于纤维蛋白原(一种可溶性血浆蛋白) 向不溶性纤维蛋白的催化转化。催化该反应的酶是凝血酶，其不会永久地以活性形式在血液中循环，但是作为凝血酶原(凝血酶的无活性前体)存在。导致有活性的凝血酶的凝固级联由两个途径组成：外源性(extrinsic)途径和内源性(intrinsic)途径，它们汇合成一个共同途径，该共同途径包括催化纤维蛋白原向纤维蛋白的转化的活性凝血酶。外源性途径响应于组织因子(因子III)的释放而在损伤部位处开始，且因而也被称作组织因子途径。组织因子是因子VIIa催化的因子X (无活性的)向因子Xa(有活性的)的活化中的辅因子。第二个更复杂的内源性途径被与血小板有关的凝固因子VIII、IX、X、XI和XII活化。还需要蛋白前激肽释放酶(PK)和高分子量激肽原(HK或HMWK)、以及从血小板分泌的钙离子和磷脂。这些组分中的每一种导致因子X向因子Xa的转化。两个途径中的共同点是因子X向因子Xa的活化。因子Xa是在两个位置(arg-thr，然后arg-ile键)切割凝血酶原的酶(例如，丝氨酸内肽酶)，这会产生活性凝血酶并最终导致纤维蛋白原向纤维蛋白的转化。

血块或纤维蛋白网络的分解(被称作纤维蛋白溶解)要求纤维蛋白转化成可溶性的产物。该裂解由以无活性形式(纤溶酶原)循环的蛋白水解酶纤溶酶催化。组织型纤溶酶原激活物(tPA)、细菌溶血酶(例如，链激酶)和存在于尿中的人蛋白水解性酶(例如，尿激酶)都会活化纤溶酶原。这些物质通常用在溶血栓疗法中。