[发明专利]被增溶酶及其用途

权利要求书

1.一种混合物，其包含多种具有生物质降解活性的多肽和增溶剂，其中相较于具有生物质降解活性的天然多肽，所述多肽具有至少8-10％的所述生物质降解活性。

2.如权利要求1所述的混合物，其进一步包含一种或多种与包涵体相关的蛋白质。

3.如权利要求1所述的混合物，其中所述混合物不包含一种或多种与包涵体相关的蛋白质。

4.如前述权利要求中任一项所述的混合物，其进一步包含细胞碎片、一种或多种核糖体组分、一种或多种宿主蛋白质和/或包括DNA和/或RNA的宿主核酸。

5.如前述权利要求中任一项所述的混合物，其中所述生物质降解活性是纤维二糖酶活性、木质素酶活性、内切葡聚糖酶活性、纤维二糖水解酶活性或木聚糖酶活性。

6.如前述权利要求中任一项所述的混合物，其中所述多肽是部分未折叠的，部分错误折叠的，或部分变性的。

7.如权利要求1所述的混合物，其中所述多肽包含与SEQ ID NO：1具有至少90％同一性的氨基酸序列。

8.如前述权利要求中任一项所述的混合物，其中所述多肽包括来自里氏木霉的Cel3A酶或其功能性变体或片段。

9.如权利要求8所述的混合物，其中所述Cel3A酶包含氨基酸序列SEQ ID NO：1或与其具有至少90％同一性的氨基酸序列。

10.如前述权利要求中任一项所述的混合物，其中所述多肽由包含与SEQ ID NO：2或SEQ ID NO：3的至少90％同一性的核酸序列编码。

11.如前述权利要求中任一项所述的混合物，其中所述多肽是无糖基化的。

12.如权利要求1-3或7中任一项所述的混合物，其中所述增溶剂包括尿素，并且任选地，以介于0.2M-6M之间的浓度存在。

13.如前述权利要求中任一项所述的混合物，其进一步包含至少一种具有生物质降解活性的额外多肽或产生一种或多种具有生物质降解活性的酶的微生物。

14.如权利要求13所述的混合物，其中所述额外多肽选自木质素酶、内切葡聚糖酶、纤维二糖水解酶、纤维二糖酶和木聚糖酶或其任何组合。

15.如权利要求13或14所述的混合物，其中所述额外多肽选自：

a.包含与SEQ ID NO：1具有至少90％同一性的氨基酸序列的多肽；

b.来自里氏木霉的Cel3A酶或其功能性变体或片段；或

c.由包含SEQ ID NO：2或SEQ ID NO：3(例如由SEQ ID NO：2或SEQ ID NO：3组成)的核酸序列编码的多肽。

16.如权利要求13-15中任一项所述的混合物，其中所述额外多肽是无糖基化的。

17.如权利要求13-15中任一项所述的混合物，其中所述额外多肽是糖基化的。

18.一种混合物，其包含具有与SEQ ID NO：1具有至少90％同一性的氨基酸序列的多种多肽和增溶剂，其中所述多种多肽具有至少20％-40％的包含SEQ ID NO：1的天然多肽的活性。

19.如权利要求18所述的混合物，其进一步包含一种或多种与包涵体相关的蛋白质。

20.如权利要求18所述的混合物，其中所述混合物不包含一种或多种与包涵体相关的蛋白质。

21.如权利要求18-20中任一项所述的混合物，其进一步包含细胞碎片、一种或多种核糖体组分、一种或多种宿主蛋白质和/或包括DNA和/或RNA的宿主核酸。

22.如权利要求18-21中任一项所述的混合物，其中所述多肽是部分未折叠的，部分错误折叠的，或部分变性的。

23.如权利要求18-22中任一项所述的混合物，其中所述多肽由包含与SEQ ID NO：2或SEQ ID NO：3的至少90％同一性的核酸序列编码。

24.如权利要求18-23中任一项所述的混合物，其中所述多肽是无糖基化的。