[发明专利]吗啉代寡核苷酸的制备方法

权利要求书

1.n+p聚体吗啉代寡核苷酸的制备方法，该方法包含下述步骤：

使p聚体吗啉代寡核苷酸与n聚体吗啉代寡核苷酸经由其吗啉环氮原子通过磷酰胺键或磷酰二胺键进行缩合后，用猝灭剂处理所得反应混合物，然后使所得反应混合物经受萃取操作，将作为产物的n+p聚体吗啉代寡核苷酸分离到有机层侧的步骤，

所述p表示1以上的任意整数，所述n表示1以上的任意整数，

所述 p聚体吗啉代寡核苷酸中，5’位羟基被活化磷酰胺化，而且吗啉环氮原子被在酸性条件下可除去的临时保护基保护，

所述n聚体吗啉代寡核苷酸中，5’末端和/或核酸碱基各自独立地被具有碳数10以上且300以下的烷基和/或碳数10以上且300以下的烯基的保护基或者在与针对前述吗啉环氮原子的临时保护基的条件不同的条件下可除去的保护基保护，而且吗啉环氮原子未被保护，

并且，所述在与针对前述吗啉环氮原子的临时保护基的条件不同的条件下可除去的保护基是乙酰丙酰基、o-硝基苄基、烯丙氧基羰基、苄基或甲硅烷基系保护基，

所述猝灭剂为具有仲氨基和羧基的化合物、或具有膦酰基的化合物，

所述具有碳数10以上且300以下的烷基和/或碳数10以上且300以下的烯基的保护基是指含有烷基和/或烯基的保护基，其中所述烷基的碳数为10以上且300以下、所述烯基的碳数为10以上且300以下，

所述具有碳数10以上且300以下的烷基和/或碳数10以上且300以下的烯基的保护基是下述式(II)所示的基团：

L表示单键或者式(a1)所示的基团：

式中，^*表示与Y的键合位置；

^**表示与待保护的氧原子或氮原子的键合位置；

L₁表示任选取代的二价C_1-22烃基；并且

L₂表示C(=O)、或者表示^***N(R³)-R¹-N(R²)C(=O)^**所示的基团，式中，^**表示与L₁的键合位置，^***表示与Y的键合位置，R¹ 表示任选取代的C_1-22亚烷基，R²和R³各自独立地表示氢原子或任选取代的C_1-22烷基，或者R²和R³任选地一起形成任选取代的C_1-22亚烷基键，

Y表示单键、氧原子或NR，其中R表示氢原子、烷基或芳烷基，以及

Z表示式(a2)所示的基团：

式中，^*表示与Y的键合位置；

环A表示苯环或环己烷环；

R⁴表示氢原子，或者当 R_b为下述式(a3)所示的基团且环A和环B都是苯环时，R⁴任选地与R⁶一起表示单键或-O-、并与环B一起形成芴基或呫吨基；

k个Q各自独立地表示单键、或者表示-O-、-S-、-OC(=O)-、-NHC(=O)-或-NH-；

k个R⁵各自独立地表示碳数10~40的烷基、具有1-3个“碳数10以上且300以下的烷基和/或碳数10以上且300以下的烯基”的苄基、或者具有1-3个“碳数10以上且300以下的烷基和/或碳数10以上且300以下的烯基”的环己基；

k表示1至4的整数；

环A除了具有k个QR⁵之外，进一步任选具有取代基，所述取代基选自卤素原子、任选被卤素原子取代的C_1-6烷基、和任选被卤素原子取代的C_1-6烷氧基；

R_a表示氢原子；

R_b表示氢原子或式(a3)所示的基团：

式中，^*表示键合位置；

环B表示苯环或环己烷环；

j表示0至4的整数；

j个Q表示与上述相同的含义；

j个R⁷各自独立地表示碳数10~40的烷基；

R⁶表示氢原子，或者任选地与R⁴一起表示单键或-O-、并与环A一起形成芴基或呫吨基；并且

环B除了具有j个QR⁷之外，进一步任选具有取代基，所述取代基选自卤素原子、任选被卤素原子取代的C_1-6烷基、和任选被卤素原子取代的C_1-6烷氧基，或者

R_a和R_b一起形成羰基。