[发明专利]核酸提纯盒

说明书

本文公开了一种微流体装置，该微流体装置有封闭腔室，该封闭腔室包含用于从复杂生物试样中提纯生物或化学分析物的过滤器，所述腔室除了所述过滤器之外还容纳有多个口部，如下所述：第一口部，该第一口部使得腔室能够通过第一流动通路而与真空发生器气体连通；第二口部，该第二口部使得腔室能够通过第二流动通路而与一个或多个储存器液体连通；第三口部，该第三口部使得腔室能够通过第三流动通路而与一个或多个接收容器和真空发生器都气体和液体连通；以及过滤器，该过滤器布置在第三口部以及第一和第二口部之间，这样，通过第一和/或第二口部进入腔室和通过第三口部离开腔室的流体流过该过滤器。本发明还涉及一种使用该微流体装置的方法。

技术领域

本发明涉及一种核酸提纯盒。

背景技术

基于DNA和RNA对于二氧化硅表面的亲和力(固相吸附)的初始核酸提纯方法由Boom等人介绍。通过高浓度的离液盐(通常为异硫氰酸胍或盐酸胍)将促进二氧化硅表面的核酸吸引。Boom的方法使用离液盐溶液来使生物试样变性，并使得它利用离心力而通过过滤器，以便促进DNA和RNA吸附至二氧化硅表面上。一旦核酸结合在过滤器上，就用乙醇缓冲剂进行一次或多次洗涤，以便除去离液盐和其它生物杂质，同时保持核酸结合(离液盐在下游应用中对于大部分核酸都是破坏性的)。作为最终步骤，在除去乙醇(通过高速旋转)后，核酸需要使用洗提缓冲液(水或低盐缓冲液)来再水合。再水合促进了DNA和RNA从二氧化硅表面的脱开，且最终的旋转产生了溶液，提纯的核酸重新悬浮在该溶液中。

这种方案的变化形式在其它地方介绍，使用离心力或真空作为液体流动驱动力。不过，所有这些方法都相当复杂和费时间，包括多个移液步骤和随后应用不同的驱动力来控制液体流动，这通常在重复提纯工艺之间产生较高的产量变化。

例如，在人工实施通过真空的提纯方案时，提纯处理包括5个主要步骤，这5个主要步骤对应于5个不同的液体流过二氧化硅过滤器，即：包含核酸、洗涤缓冲液1和洗涤缓冲液2的试样混合物，用于清洗过滤器，并消除任何量的污染物；空气，用于干燥过滤器和消除任何挥发性污染物的痕迹；以及洗提缓冲液，用于从过滤器上释放核酸，因此，NAs可进一步用于下游用途(例如qPCR放大和检测)。在各步骤结束时，甚至在一定容积的液体流过过滤器之后还保持真空吸力1或2分钟，以便保证在下一次液体移液之前几乎没有液体留在过滤器裂缝内。

核酸生产的可复制性取决于对试样和缓冲液与过滤器的接触时间以及液体流的量和分布进行复制的可能性，这取决于操作人员的技能。

因此，本发明的目的是提供一种提纯装置，该提纯装置提供了独立于各操作人员的、可复制的提纯结果。

这通过一种用于从复杂生物试样中提纯生物或化学分析物的微流体装置和方法而实现。该微流体装置包括：腔室，过滤器嵌入该腔室中；多个储存器；以及阀。所述装置能够与外部泵交接，该外部泵通过自动仪器来操作。因此，这里的装置和方法提供了传统核酸提纯方法的端对端的自动实施方式。

发明内容

本发明涉及一种微流体装置，该微流体装置有封闭腔室，该封闭腔室包含用于从复杂生物试样中提纯生物或化学分析物的过滤器，所述腔室除了所述过滤器之外还容纳有多个口部，如下所述：第一口部，该第一口部使得腔室能够通过第一流动通路而与真空发生器进行气体连通；第二口部，该第二口部使得腔室能够通过第二流动通路而与一个或多个储存器进行液体连通；第三口部，该第三口部使得腔室能够通过第三流动通路而与一个或多个接收容器和真空发生器都进行气体和液体连通；以及过滤器，该过滤器布置在第三口部以及第一和第二口部之间，这样，通过第一和/或第二口部进入腔室和通过第三口部离开腔室的流体流过该过滤器。