[发明专利]使用水凝胶诱导干细胞三维成骨分化的方法有效
申请号: | 201580050101.2 | 申请日: | 2015-09-15 |
公开(公告)号: | CN107075476B | 公开(公告)日: | 2020-11-17 |
发明(设计)人: | 朴贤淑;李尚瑞;杨智苑;楚雪;牟贤振 | 申请(专利权)人: | CEFO有限公司 |
主分类号: | C12N5/077 | 分类号: | C12N5/077;C12M3/00 |
代理公司: | 深圳鼎合诚知识产权代理有限公司 44281 | 代理人: | 孙银行;彭愿洁 |
地址: | 韩国首尔特别市钟路*** | 国省代码: | 暂无信息 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 使用 凝胶 诱导 干细胞 三维 分化 方法 | ||
1.一种用于在3-7天内从干细胞诱导成骨分化的方法,其特征在于,所述方法包括:
将多孔膜以非接触方式置于细胞培养容器内;
在所述多孔膜的一个表面上施加包括5-15%水凝胶的水凝胶溶液以通过溶胶-凝胶相转变在其上包被水凝胶;
在包被的水凝胶上接种干细胞;和
在成骨分化诱导培养基中培养所述干细胞,
其中所述水凝胶在37℃的细胞培养温度下处于凝胶相,并且所述水凝胶在37℃的粘度为1.E+00至1.E+06(100至106)mPa·s,
其中所述水凝胶在低于所述细胞培养温度的温度下处于溶胶相,
其中通过所述溶胶-凝胶相转变产生的所述水凝胶具有1mm至4mm的厚度,
其中所述多孔膜具有0.1-8μm的孔径,
其中所述多孔膜和所述水凝胶允许空气和培养基透过。
2.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述培养基在所述多孔膜和所述细胞培养容器之间流动,以增加所述干细胞和所述培养基之间的接触表面积,从而缩短成骨分化诱导的时间。
3.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述干细胞是脐带间充质干细胞、脂肪来源的间充质干细胞、牙周韧带细胞或骨髓来源的间充质干细胞。
4.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述溶胶-凝胶相转变在37℃下进行1至2小时。
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