[发明专利]具有优异免疫学特性的优异的人乳头瘤病毒抗原和含有其的疫苗

权利要求书

1.编码人乳头瘤病毒主要衣壳蛋白的分离基因，其中所述基因选自SEQ ID NO.2、SEQ ID NO.3、SEQ ID NO.4和SEQ ID NO.5。

2.包含编码人乳头瘤病毒主要衣壳蛋白之基因的载体，其中所述基因选自SEQ ID NO.2、SEQ ID NO.3、SEQ ID NO.4、SEQ ID NO.5及其组合。

3.权利要求2所述的载体，其选自pPICZ、pPIC6、pGAPZ和pAO815z。

4.权利要求2所述的载体，其具有选自MTCC 5969、MTCC 5970、MTCC 5971或MTCC 5972的MTCC登录号。

5.以权利要求1所述的基因转化的宿主细胞。

6.包含权利要求2所述的载体的宿主细胞。

7.权利要求5和6所述的宿主细胞，其是酵母细胞，优选巴斯德毕赤酵母(P.pastoris)。

8.权利要求6所述的宿主细胞，其选自巴斯德毕赤酵母菌株X-33、GS115、KM71和SMD1168。

9.通过使用权利要求1所述的基因获得的病毒样颗粒。

10.权利要求9所述的病毒样颗粒，其直径在50-500nm，优选50-400nm，更优选100-400nm的范围内。

11.人乳头瘤病毒疫苗，其包含至少一个来自权利要求1所述的编码衣壳蛋白的基因，其可引发针对HPV抗原的免疫应答。

12.权利要求11所述的人乳头瘤疫苗，其还包含编码单一或不同血清型之L2、E6或E7抗原的基因。

13.权利要求12所述的血清型，其选自HPV 16、HPV 6、HPV 18、HPV 11、HPV 31、HPV 33、HPV 45、HPV 52、HPV 58及其组合。

14.免疫原性组合物，其含有合适的佐剂与至少一种权利要求1所述HPV抗原的蛋白。

15.权利要求14所述的佐剂，其选自铝盐、单磷酰基脂质类似物例如吡喃葡糖基脂质佐剂、monatide、细胞因子诱导剂、基于角鲨烯的佐剂、亲脂性佐剂及其组合。

16.制备权利要求11所述的人乳头瘤疫苗的方法，其包括以下步骤：

a.合成编码人乳头瘤病毒主要衣壳蛋白的基因，

b.构建编码人乳头瘤病毒主要衣壳蛋白之基因的表达载体，

c.选择具有高拷贝数的所述人乳头瘤病毒蛋白之转化基因的克隆，

d.进行所述人乳头瘤病毒蛋白之转化基因的表达分析，

e.纯化由所述人乳头瘤病毒蛋白之基因编码的蛋白质，

f.制备所述人乳头瘤病毒蛋白之VLP的批量溶液，

g.表征宿主细胞中的所述蛋白质，

h.制备含有所述人乳头瘤病毒蛋白的疫苗。

17.权利要求16所述的制备人乳头瘤疫苗的方法，其中所述宿主细胞是酵母细胞，优选巴斯德毕赤酵母。

18.前述权利要求中任一项所述的主要衣壳蛋白，其是单一或不同血清型的HPV L1。

19.权利要求18所述的HPV L1蛋白，其选自HPV 16 L1、HPV 18 L1、HPV 6 L1、HPV 11 L1、HPV 31 L1、HPV 33 L1、HPV 45 L1、HPV 52 L1、HPV 58 L1及其组合，优选HPV 16 L1、HPV 18 L1、HPV 6 L1、HPV 11 L1及其组合。