[发明专利]检测多种流感的试剂盒和使用其检测流感的方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种检测多种流感的试剂盒和使用该试剂盒检测多种流感病毒的方法。更具体地，本发明涉及包含特异性结合A型、B型、H1亚型、H3亚型和H5亚型流感的单克隆抗体的检测多种流感的试剂盒，以及使用该试剂盒检测流感病毒的方法。

背景技术

流感病毒是引起病毒性呼吸道疾病的病原体，基于它们的NP(核衣壳)和M(基质)蛋白的抗原差异而将其大致分为A型、B型和C型。其中，基于它们的HA(血凝素)蛋白的抗原性，可以将A型进一步分为H1至H15亚型，基于它们的NA蛋白的抗原特性，可以将A型进一步分为N1至N9亚型(参见Wiely DC和Skehel TT，Ann Rev Biochem，56：365-394,1987)。其中，H1、H2、H3、N1和N2亚型通常会在人类中引起疾病。出现在鸟类中的H和N抗原通常不会在人类中引起疾病，但是当病毒中发生遗传突变或当病毒与引起人类疾病的抗原交换基因时，其甚至可以变为能够在人类中引起疾病的类型。如果出现这种人类先前对其没有免疫力的新型流感病毒，那么其可能会引起全球范围的流行。

近年来，已经开发了用于检测这样的流感病毒的各种诊断试剂盒。特别是，随着由诸如猪流感的高致病性禽流感病毒所引起的死亡数量的迅速增加，人们需要用于早期诊断的快速诊断试剂盒。在诸如学校和工作地点等公共场所传播给许多非特定人群的疾病(如2009年的新型猪流感大流行)的情况下，需要在诊断时检疫早期感染者，以防止大流行，且需要快速和准确的早期检测系统。这样的系统是公共安全所必需的国家公共系统。用于现场诊断的快速诊断系统应当尺寸较小以便于携带，应该易于使用，并且应该提供用户界面以便用户较容易地操作。

用于诊断流感的三种主要常规方法是病毒培养测试、快速抗原测试和PCR测试。在这些方法中，作为传统诊断方法的病毒培养方法虽然准确，但其具有费时和复杂的局限，因此只能提供晚期诊断结果。另外，该方法也不能应用于治疗。此外，基于抗原—抗体反应以初步鉴别流感感染者的快速抗原测试法是一种仅需要约30分钟的方便且快速的测试，并且具有测试不需要额外的系统和技术人力的优点。然而，快速抗原测试的缺点在于，由于其仅检测A型和B型核蛋白，所以其灵敏度和准确度较低，因此可能导致错误诊断而引起患者死亡。因此，该方法难以应用于现场诊断。亚型流感的诊断成为能够预测对流感治疗药物的抗性的指数，并且指示流行病学上显著疾病的患病率。目前，仅通过RT-PCR对亚型流感诊断是可能的，但是昂贵，并且H1/A/B诊断试剂(SD有限公司)是用于抗原快速诊断的唯一试剂，其能够鉴定A型的亚型，而在世界范围内尚未开发和使用其他试剂。

已被用作猪流感诊断测试的实时PCR由于其高灵敏性和准确性而成为了感染性疾病诊断的最有效的手段。然而，其需要2～4小时的测试时间，因此可能不能用于现场诊断。基于这些原因，当由专业组织进行时，通常需要约2～3天的时间来确认测试结果。此外，该方法十分昂贵。因此，在预期感染性疾病大流行的时间点，该实时PCR不能用作国家范围内的最初措施。此外，感染各种鸟类(包括鸡、火鸡和野生鸟类)以及人类的禽流感迅速蔓延，具有各种致病性。因此，在高致病性禽流感发生的情况下，在世界上的大多数国家中已感染的鸟类被杀死。此外，由于不能出口鸡肉产品，发生高致病性禽流感的国家将遭受严重损失。

因此，本发明人进行了大量的努力以解决上述问题，最终，开发了一种流感检测试剂盒，其不仅能够检测A/B型流感的核蛋白，而且能够同时检测H1、H3和H5亚型流感的血凝素，而没有交叉反应，并且已发现使用开发的流感检测试剂盒甚至能够现场检测并且诊断甚至亚型流感(包括H5亚型禽流感)，从而完成了本发明。

发明内容

技术问题

本发明的一个目的是为了提供除了A型和B型流感之外还能同时检测H1、H3和H5亚型流感的检测多种流感的试剂盒。本发明的另一个目的是提供使用所述检测多种流感的试剂盒检测流感的方法。

技术方案

为了实现上述目的，本发明提供了包含第一检测条(strip)和第二检测条的检测多种流感的试剂盒，其中，所述第一检测条和第二检测条的每个包括样品垫、结合垫、信号垫和吸收剂垫，

其中，所述第一检测条的结合垫和信号垫包含能够分别特异性结合H3亚型流感、A型流感和B型流感的单克隆抗体，并且

其中，所述第二检测条的结合垫和信号垫包含能够分别特异性结合H1亚型流感和H5亚型流感的单克隆抗体。

本发明还提供了使用所述检测多种流感的试剂盒检测流感的方法。

附图说明