[发明专利]HSP27的有效抑制

说明书

技术领域

本发明涉及一种新的嘌呤衍生物及其作为药物对热休克蛋白HSP27(HSPB1)的选择性抑制的应用。

背景技术

以细胞生长抑制剂的治疗方式对于某些癌症，从一开始就无法得到治疗效果，即使是患者所患为轻易可治愈癌症类型，以细胞生长抑制剂的治疗方式可能会在一段时间后失效，一个可能的原因为抗性的产生，肿瘤细胞因此而对细胞生长抑制剂渐不敏感，其背后的生物过程为已知的。

由此可知，以细胞生长抑制剂对于各种肿瘤细胞系的治疗导致了细胞蛋白质表达量的增加，而这对于受体、酶和细胞结构蛋白的正确折叠的保护和稳定等影响重大。

热休克蛋白为一种进化高度保守的蛋白质，由细胞在亚致死胁迫条件下形成。热休克蛋白是分子伴侣利用其自然天性，通过热或化学制品将变性蛋白质再次还原到初始功能状态，或是防止蛋白质变性。通过该运作方式，热休克蛋白过度表达在多种癌细胞，因此近年来，热休克蛋白已成为具希望的、用于癌症治疗的靶蛋白。

热休克蛋白HSP27(HSPB1)参与于多种细胞过程，例如：细胞凋亡(程序性细胞死亡)、DNA修复和重组等。HSP27过表达在各种癌症，例如：前列腺癌，结肠癌，肝癌和乳腺癌等，并影响疾病的进展。人们发现，HSP27伴随化疗時，对於例如吉西他滨(2’，2’-Difluordesoxycytidin)或硼替佐米(Velcade)等细胞生长抑制剂，其表达增加且抗性增加。由于HSP27对化疗的不利影响，HSP27被认为是癌症治疗中具希望的额外攻击点，特别是用于抑制化疗耐药的形成。

在日本专利JP 2010215669 A或美国专利US 2012/294846 A1中描述一种可能治疗方法，其原理为：通过直接干预翻译或干预转录，并藉由反义寡核苷酸的胞内应用或借由双链小干扰RNA(siRNA)，来抑制HSP27的基因表达。其中，核苷酸类抑制剂与DNA或RNA结合，从而具体防止HSP27在细胞的形成。

对此，欧洲专利WO 2013 114339 A1公开了一种用于癌症的联合治疗方法，其根基于核苷酸酶抑制剂的协同效果，用于抑制HSP27的表达，并针对该蛋白EGFR(表皮生长因子受体)而与一抑制剂结合，例如厄洛替尼，或抗叶酸如培美曲塞。该核苷酸酶抑制剂优选为一反义寡核苷酸或一双链siRNA。

然而，核苷酸酶抑制剂的使用缺点为产生过量负电荷和相关药物分子的强极性，使其生物利用度显着降低，更大问题则为核苷酸酶抑制剂的化学不稳定性，尤其是RNA抑制剂的化学不稳定性。

更多的缺点为核苷酸酶抑制剂的转染过程(亦即，将外源性寡核苷酸带入真核细胞内)极为复杂且部分效率极低。此外，短核苷酸抑制剂具有潜在免疫原性的缺点，例如通过分泌也可作用于非转染细胞(如巨噬细胞)，因而促使在生物体内产生一强大且对于患者有害的免疫应答。

另一种用来替代核苷酸酶抑制剂的方法为使用低分子量的有机化合物，因其通常在生物系统中具有高度稳定性，并同时具有良好的生物利用度，尤其是在高度特异性化合物的条件下，不会发生像在其他方法中发生的典型“脱靶效应”(例如通过其它必要的转染)。

于此，德国专利DE 10 2008 035 299 A1描述了一种方法：低分子有机化合物-溴乙烯基脱氧尿嘧啶(E)-5-(2-Bromovinyl)-2’-Deoxyuridine(BVDU)，其可以直接与蛋白HSP27相互作用，而抑制HSP27的功能。BVDU作为一种HSP27的弱抑制剂，可增加细胞生长抑制剂诱导细胞凋亡的敏感性，从而使胰腺癌患者通过口服BVDU而提高其生存优势。胰腺癌患者在晚期临床研究显示，500毫克/天的BVDU剂量为安全有效剂量，然而当BVDU剂量提高为760毫克/天时，则不利于体重较轻的患者。

上述BVDU化合物及其衍生物为德国专利DE 10 2008 035 299 A1中唯一已知的HSP27小分子抑制剂，而该现有的活性物质在结合亲和力上，尚有极大改善空间。

欧洲专利WO 2009/156182 A2中公开一尿嘧啶衍生物的通式I：

其在细胞抑制治疗中与一细胞生长抑制剂一起使用，以抑制或降低其抗性发展。欧洲专利WO 2009/156182 A2中并没有显示出对这些化合物所做假设实验的验证方法，因此该公开文件既没有可资参考的抑菌浓度数值也没有可资参考的各该化合物活性物质浓度数值。