[发明专利]用于诊断血液癌症的方法

说明书

本发明涉及一种用于诊断血液癌症的方法。具体地，本发明涉及一种用于诊断患者中的的血液癌症的方法，所述方法包括：i)检测由所述患者获得的样品中的CD45RARO NK细胞的存在，以及ii)在所述样品中检测到CD45RARO NK细胞的存在并且至少一种表型标志物的存在表明血液癌症的性质的情况下，推断患者患有血液癌症。

技术领域

本发明涉及一种诊断血液癌症的方法。

背景技术

自然杀伤(NK)细胞是淋巴细胞谱系的成员且属于固有免疫系统。它们显示出天然细胞毒性并产生细胞因子^1,2。大多数外周血中的人NK细胞是CD3^-CD56^暗细胞，少数显示CD3^-CD56^亮表型。后一群体擅长产生细胞因子，而CD56^暗细胞主要显示细胞毒性活性³。与此相反，CD3^-CD56^亮细胞在淋巴结和扁桃体中占多数。体外证据表明CD56^亮细胞是CD56^暗细胞的前体，在体内也是这种情况⁴。此外，CD16表达暗示NK细胞发育遵循此路径：CD56^亮CD16^-→CD56^亮CD16^暗→CD56^暗CD16^暗→CD56^暗CD16⁺。额外的标志物可以鉴定这些群体中的其他的亚类^5,6。相比之下，活化NK细胞的体内鉴定更加困难。虽然CD69长期表达是未知的，但CD69表达在NK细胞刺激后增加，并且被认为是包括人类在内的活化的真正标志物⁷。在小鼠中，长期刺激后CD69的稳定表达存在争议：鼠CMV感染后CD69表达是瞬时的⁸，而IL-15处理后是CD69表达是稳定的⁹。

NK细胞在遇到它们的靶标后被活化，所述靶标主要是主要组织相容性复合物I(MHC-I)的表达改变的细胞，上述细胞包括转化的细胞或病毒感染的细胞(其下调MHC-I表达以逃避细胞毒性T淋巴细胞(CTL)的识别)。“丧失自我(missing self)”假说提出NK细胞基于MHC-I表达区分靶细胞与其他健康的“自身”细胞。NK细胞活化取决于由活化和抑制性受体介导的复杂信号机制。主要的NK细胞抑制性受体识别MHC-I(在人类中称为HLA)复合物，且包括识别HLA-E的NKG2A和识别自身经典I类分子HLA-A、HLA-B和HLA-C的杀伤细胞免疫球蛋白样受体(KIR)。活化NK细胞的受体感知细胞上的应激和/或非自身配体，即通过激活受体NKG2D来识别应激诱导的配体UL16结合蛋白(ULBP)和MHC I类多肽相关序列(MIC)²。

NK细胞识别并消除血源性癌细胞。然而，这些肿瘤细胞发现了不同的免疫逃避机制^10,11，并且显著数量的这类患者显示出有限的长期存活。治疗这些患者的一些选择包括可以与免疫治疗相关的新化学物质¹²。最近发表了使用抗KIR的首次临床试验，其中抗KIR能阻断KIR介导的对NK细胞的抑制⁷。与可比较的急性骨髓性白血病(AML)患者群体的报道相比，其显示出没有毒性、总体有利且无复发存活的特点。该治疗的一个令人关注的替代方法是使用同种异体NK细胞，这是因为已证明同种异体NK细胞临床级产品是有效的¹³且造血细胞移植后NK细胞介导的治疗似乎是安全的^14-16。然而，NK细胞不是同质群体，有保持不同生理活性的不同亚类。此外，NK细胞的不同活化模式(例如细胞因子vs靶细胞)源自不同的转录模式¹⁷。鉴定具有较高抗肿瘤活性的群体并选择它们进行扩增和/或患者输注将是令人关注的。