[发明专利]氧化酶、编码该酶的多核苷酸、以及它们的应用有效
申请号: | 201580037342.3 | 申请日: | 2015-07-02 |
公开(公告)号: | CN106661571B | 公开(公告)日: | 2019-12-20 |
发明(设计)人: | 朝子弘之 | 申请(专利权)人: | 住友化学株式会社 |
主分类号: | C12N15/09 | 分类号: | C12N15/09;C12N1/15;C12N1/19;C12N1/21;C12N5/10;C12N9/04;C12P13/04;C12P13/06;C12P13/12 |
代理公司: | 72001 中国专利代理(香港)有限公司 | 代理人: | 郭煜;万雪松 |
地址: | 日本*** | 国省代码: | 日本;JP |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 氧化酶 编码 多核苷酸 以及 它们 应用 | ||
1.编码下述(A1)或(A3)的氨基酸序列的多核苷酸:
(A1)SEQ ID NO:3所示的氨基酸序列、
(A3)i)在SEQ ID NO:3所示的氨基酸序列中,具有选自第109位的缬氨酸置换为异亮氨酸、第191位的甘氨酸置换为天冬氨酸和第246位的谷氨酰胺置换为精氨酸中的1个以上氨基酸置换的改变的氨基酸序列,并且ii)具有将2-羟基-4-(甲硫基)丁酸氧化转换成对应的2-氧代-4-(甲硫基)丁酸的能力和将α-羟基-异己酸氧化转换成对应的α-氧代-异己酸的能力中的任一或两者的蛋白质的氨基酸序列。
2.权利要求1记载的多核苷酸,其具有包含以使得编码所述氨基酸序列的核苷酸序列的密码子使用频率匹配大肠杆菌的密码子使用频率的方式选择的密码子的改变的核苷酸序列。
3.在宿主细胞内可发挥功能的启动子与权利要求1或2记载的多核苷酸以可发挥功能的形式连接而成的多核苷酸。
4.含有权利要求1至3中任一项记载的多核苷酸的重组载体。
5.将权利要求1至3中任一项记载的多核苷酸或权利要求4记载的重组载体导入宿主细胞而成的转化体。
6.权利要求5记载的转化体,其中宿主细胞是微生物。
7.拥有权利要求1至3中任一项记载的多核苷酸的转化体。
8.重组载体的制备方法,其包含在可在宿主细胞内复制的载体中整合权利要求1至3中任一项记载的多核苷酸的步骤。
9.转化体的制备方法,其包含将权利要求1至3中任一项记载的多核苷酸或权利要求4记载的重组载体导入宿主细胞的步骤。
10.编码下述(B1)的氨基酸序列的多核苷酸:
(B1)SEQ ID NO:1所示的氨基酸序列。
11.在宿主细胞内可发挥功能的启动子与权利要求10记载的多核苷酸以可发挥功能的形式连接而成的多核苷酸。
12.含有权利要求10或11记载的多核苷酸的重组载体。
13.将权利要求10或11记载的多核苷酸或权利要求12记载的重组载体导入宿主细胞而成的转化体。
14.权利要求13记载的转化体,其中宿主细胞是微生物。
15.拥有权利要求10或11记载的多核苷酸的转化体。
16.重组载体的制备方法,其包含在可在宿主细胞内复制的载体中整合权利要求10或11记载的多核苷酸的步骤。
17.转化体的制备方法,其包含将权利要求10或11记载的多核苷酸或权利要求12记载的重组载体导入宿主细胞的步骤。
18.含有权利要求1至3中任一项记载的多核苷酸和权利要求10或11记载的多核苷酸的重组载体。
19.权利要求18记载的重组载体,进一步包含编码具有将α-氧代羧酸化合物氨基化转换成对应的L-α-氨基酸化合物的能力的蛋白质的氨基酸序列的多核苷酸、或该多核苷酸与在宿主细胞内可发挥功能的启动子以可发挥功能的形式连接而成的多核苷酸。
20.权利要求19记载的重组载体,其中具有将α-氧代羧酸化合物氨基化转换成对应的L-α-氨基酸化合物的能力的蛋白质是亮氨酸脱氢酶。
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