[发明专利]用于纯化蛋白质的方法和试剂

权利要求书

1.一种用于从样品纯化蛋白质的方法，所述方法包括：

将所述样品负载至色谱柱上，

用洗涤缓冲液洗涤所述柱，其中所述洗涤缓冲液具有80mS/cm或更高的电导率，以及

用洗脱缓冲液从所述柱洗脱所述蛋白质。

2.如权利要求1所述的方法，其中所述洗涤缓冲液包含选自由(NH₄)₂SO₄、Na₂SO₄和CH₃COONa组成的组的盐。

3.如权利要求2所述的方法，其中所述洗涤缓冲液包含约0.8M(NH₄)₂SO₄的浓度。

4.如权利要求1所述的方法，其中所述洗脱缓冲液具有80mS/cm或更高的电导率。

5.如权利要求1所述的方法，其中所述洗脱缓冲液包含选自由NaCl、KCl和NaOAc组成的组的盐。

6.如权利要求5所述的方法，其中所述洗脱缓冲液包含约1MNaCl的浓度。

7.如权利要求1所述的方法，其中所述方法包括至少两个洗涤步骤。

8.如权利要求7所述的方法，其中第一洗涤步骤包括用具有2mS/cm或更小电导率的缓冲液洗涤所述柱。

9.如权利要求8所述的方法，其进一步包括第三洗涤步骤，其中所述第三洗涤步骤包括用具有2mS/cm或更小电导率的缓冲液洗涤所述柱。

10.如权利要求1所述的方法，其中所述蛋白质是酶。

11.如权利要求10所述的方法，其中所述酶是DNA酶或RNA酶。

12.如权利要求11所述的方法，其中所述DNA酶是重组DNA酶。

13.如权利要求10所述的方法，其中所述酶是DNA酶，并且其中所述方法中使用的所述缓冲液包含CaCl₂。

14.如权利要求13所述的方法，其中所述方法中使用的所述缓冲液包含1mM CaCl₂。

15.如权利要求1所述的方法，其中所述色谱柱是离子交换或混合模式的色谱柱。

16.如权利要求15所述的方法，其中所述混合模式的柱是多模式阴离子交换器。

17.如权利要求16所述的方法，其中所述混合模式的柱是Capto Adhere柱。

18.如权利要求1所述的方法，其中所述样品是细胞培养物样品。

19.如权利要求1所述的方法，其中所述负载样品的pH介于5.0与9.0之间。

20.如权利要求19所述的方法，其中所述负载样品的pH介于6.0与8.0之间。

21.如权利要求20所述的方法，其中所述负载样品的pH是约7.0。

22.如权利要求1所述的方法，其中所述负载样品的pH与所述蛋白质的pI相同或高于所述蛋白质的pI。

23.如权利要求1所述的方法，其中所述洗涤缓冲液的pH介于约5.0与约9.0之间。

24.如权利要求23所述的方法，其中所述洗涤缓冲液的pH是约7.0。

25.如权利要求1所述的方法，其中所述洗脱缓冲液的pH介于约5.0与约9.0之间。

26.如权利要求25所述的方法，其中所述洗脱缓冲液的pH是约7.0。

27.如权利要求1所述的方法，其中所述方法还包括在将所述样品负载至所述色谱柱上之前向所述样品添加清洁剂。

28.如权利要求27所述的方法，其中所述清洁剂是Triton X-100。

29.如权利要求28所述的方法，其中将所述清洁剂以0.5％的最终浓度添加至所述样品。