[实用新型]一种改进的低频细胞循环分选系统有效
申请号: | 201521104798.0 | 申请日: | 2015-12-29 |
公开(公告)号: | CN205275609U | 公开(公告)日: | 2016-06-01 |
发明(设计)人: | 付琥 | 申请(专利权)人: | 付琥 |
主分类号: | C12M1/42 | 分类号: | C12M1/42;C12M1/36 |
代理公司: | 暂无信息 | 代理人: | 暂无信息 |
地址: | 100097 北京市海*** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 改进 低频 细胞 循环 分选 系统 | ||
技术领域
本实用新型涉及一种改进的低频细胞循环分选系统。
背景技术
目前国内外的免疫磁性分选细胞技术主要有德国美天旎公司的 分离柱分离,加拿大干细胞公司的磁极分离。这些细胞分选技术存在 着分选低频细胞(含量低的细胞)的能力差,分选样品量不能满足临 床的需求等问题。另外,在磁极分选过程中由于温度问题等,血液细 胞容易被损伤及粘连成簇。
实用新型内容
为了解决这些问题,本实用新型公开了一种改进的低频细胞循环 分选方法,包括如下步骤:
第一步:在控制系统设定分选的流速、磁场强度和分离区温度;
第二步:在进样室中接收临床上采集的血样与磁珠和抗体孵育完 成后的血样;
第三步:在混合室中同时接收通过样品泵从进样室流来的血样及 通过缓冲液泵流来的缓冲液后,样品与缓冲溶液以一定比例混合后形 成混合样;
第四步:分离泵将混合样输送至圆形分离区域,在分离区域中混 合样中与磁珠连接的靶细胞/非靶细胞被磁场吸引滞留在磁场内,没 有连接磁珠的非靶细胞/靶细胞从磁场中流出;
第五步:圆形半导体制冷片覆盖在圆形分离区域上方,以对分离 区域的温度进行控制防止血细胞在磁场中被损伤;
第六步:没有连接磁珠的非靶细胞/靶细胞直接流入回收样品管;
第七步:然后,通过控制系统将磁场极性反转,防止与磁珠连接 的靶细胞/非靶细胞粘连成簇,之后去掉磁场,用洗脱液洗脱与磁珠 连接的靶细胞/非靶细胞,并收集至回收样品管;
第八步:在装有没有连接磁珠的非靶细胞/靶细胞的回收样品管 中加入第二种磁珠和抗体孵育之后形成二次样品,将回流软管通过接 口插入此回流样品管底部,控制系统打开回流软管上的回流泵使二次 样品回流至混合室中,同时通过缓冲液泵使缓冲液流至混合室中,二 次样品与缓冲溶液以一定比例混合后形成二次混合样;
第九步:然后重复上述第四步至第七步即可完成二次分选;
第十步:然后不断重复上述第八步至第九步即可完成多次分选。
本实用新型公开的上述一种改进的低频细胞循环分选方法,其 中,磁场强度在200-600mT之间可调,分离区温度在25-35℃可调。
本实用新型公开的上述一种改进的低频细胞循环分选系统的一 个实施例中,包括一个进样室、一个缓冲液瓶、一个混合室、磁极平 台、回收样品管和控制系统,进样室通过管道与混合室连接,缓冲液 瓶通过管道与混合室连接,磁极平台的前部设有一个圆形分离区域, 磁极平台的圆形分离区域分布四个可调节的电磁场,圆形分离区域上 方覆盖有圆形半导体制冷片,混合室下部的管道“U”形穿过磁极平 台的圆形分离区域后连接至回收样品管,回收样品管侧面开有接口, 连接至混合室的回流软管通过接口可拆卸插入至回收样品管底部,进 样室和混合室之间、缓冲液瓶和混合室之间、混合室下部穿过磁极平 台的圆形分离区域的管道上及连接至混合室的回流软管分别设有样 品泵、缓冲液泵、分离泵和回流泵,样品泵、缓冲液泵、分离泵、回 流泵和电磁铁与控制系统耦合连接。
本实用新型公开的上述一种改进的低频细胞循环分选系统的上 述实施例中,系统可以分选的样品量为0.5ml至50ml。
本实用新型公开的上述一种改进的低频细胞循环分选系统的另 一个实施例中,进样室、缓冲液瓶和混合室为两个,磁极平台的前部 设有两个圆形分离区域,每个圆形分离区域上方覆盖有圆形半导体制 冷片,磁极平台的每个圆形分离区域分布四个可调节的电磁场,每个 混合室下部的管道“U”形穿过磁极平台的其中一个圆形分离区域后 连接至回收样品管。
本实用新型公开的上述一种改进的低频细胞循环分选系统的上 述实施例中,系统可以分选的样品量为0.5ml至100ml。
本实用新型公开的上述一种改进的低频细胞循环分选系统的另 一个实施例中,磁极平台的前部设有四个圆形分离区域,磁极平台的 每个圆形分离区域分布四个可调节的电磁场,每个圆形分离区域上方 覆盖有圆形半导体制冷片,每个混合室下部的管道“U”形穿过磁极 平台的其中两个圆形分离区域后连接至回收样品管。
本实用新型公开的上述一种改进的低频细胞循环分选系统的上 述实施例中,系统可以分选的样品量为0.5ml至200ml。
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