[实用新型]一种难辨梭状芽孢杆菌毒素快速检测试剂条

说明书

技术领域

本实用新型涉及一种体外诊断类医疗器械，尤其涉及一种难辨梭状芽孢杆菌毒素 快速检测试剂条。

背景技术

难辨梭状芽孢杆菌（Clostridiumdifficile，CD）是引起抗生素相关性腹泻和肠 炎最主要的病原菌，被认为是医院内感染性腹泻最主要的原因。感染CD的临床表现可以从 无症状携带，轻中度腹泻到致命性的伪膜性肠炎(pseudomenbranouscolitis，PMC)，中毒 性巨结肠及肠穿孔等。随着抗生素的滥用，化疗以及呼吸机等侵入性治疗的增多和推广，以 及人口老年化，CDAD的发病率和死亡率呈逐年增加的趋势，尤其在过去十年，出现越来越多 的CDAD病例，原来的低危人群也有发展为严重病例的风险，而高毒力菌株的出现和传播更 使病情严重化，增加了患者的死亡率。难辨梭状芽孢杆菌相关性疾病（Clostridium difficile-associateddisease,CDAD)已逐渐成为一个严重的公众健康问题，其在年 老体弱患者中的死亡率可高达25％。早期正确的诊断对病人的管理和感染的控制显得尤为 重要。

根据2010年美国卫生保健流行病学协会（theSocietyforHealthcare EpidemiologyofAmerica，SHEA)和美国感染病协会（theInfectiousDiseasesSociety ofAmerica，IDSA)对成人CDI临床实施指南推荐，两步法检测用于诊断CDI：谷氨酸脱氢酶 （glutamatedehydrogenase，GDH)检测作为初筛试验，阳性样本进一步行细胞毒素分析 （cellcytotoxicityassay，CCA）或毒素培养（toxigenicculture，TC）检测确诊。细胞培 养细胞毒素分析（thecell-culturecytotoxicityassay，CCA）和毒素培养（toxigenic culture，TC）被认为是诊断CDI感染的金标准。

CCA是将过滤除菌的粪便标本上清加入单层细胞培养上清中，共培养24-48小时后 观察毒素，主要是TcdB引起的细胞病变。为观察CD毒素引起的特异细胞病变，试验需要同时 平行做加入CD抗毒素的中和试验。

TC则需要先接种粪便标本在CD选择性培养基上，然后用EIA或CCA检测CD分泌的毒 素。厌氧培养一般需要48小时左右。较之CCA，TC具有更高的灵敏性。但不管是CCA还是TC，都 需要专门的试验设备和高水平技术人员，且试验耗时较长，不适合推广使用。

Real-timePCR检测CD的毒素基因是近年发展起来的一种新方法，Real-timePCR 检测的特异性在90－95％，灵敏性在95－96％。Real－timePCR的缺点在于由于其过于灵 敏造成的假阳性，尤其是住院并由于其他原因造成腹泻的患者或CD的无症状携带者。另一 个限制Real－timePCR广泛应用的因素在于其需要专门的仪器和专业的技术人员，而且单 人份检测价格昂贵。

目前临床最常用的CDI检测方法是酶联免疫分析（enzymeimmunoassay，EIA）检 测CD毒素TcdA或TcdA和/或TcdB，这种方法可测试多人份样本，操作简单快速，技术要求高， 但缺点是也需要与专门仪器设备配套，对试验人专业性具有一定要求，不利于大规模样本 的快速筛查及现场检验操作。

发明内容

为了克服现有对于难辨梭状芽孢杆菌毒素检测方式中检测操作繁琐、对实验人员 专业技术要求较高，试验时间久且需专业仪器配套的不足，本实用新型提供了一种新型难 辨梭状芽孢杆菌毒素的快速检测试剂条，可实现简单、快速、准确的对难辨梭状芽孢杆菌毒 素TcdA和TcdB毒素的联合检测。

为解决上述缺陷本实用新型提供的技术方案是：