[实用新型]一种检测人血清中抗体的ELISA试剂盒

说明书

技术领域

本实用新型涉及免疫学检测技术领域，具体涉及一种检测人血清中炎症性肠病相关抗体的酶联免疫吸附法（ELISA）试剂盒。

背景技术

炎症性肠病（IBD）是一种病因尚未十分明确的慢性非特异性肠道炎症性疾病，包括溃疡性结肠炎（UC）和克罗恩病（CD）。炎症性肠病的发病机制尚未阐明，目前认为是基因易感人群对肠道共生微生物产生的过度的先天或后天免疫反应所致。是一种病变部位发生在直肠和结肠的非特异性炎症，病灶主要限于大肠黏膜与黏膜下层。克罗恩病是一种慢性肉芽肿性炎症，病变可累及胃肠道各部位，而以末段回肠及临近结肠为主，多呈节段性、非对称性分布。

目前对于炎症性肠病的诊断主要依靠临床表现，结肠镜检查，影像学检查以及病理活检等,误诊率较高。目前尚缺乏特异性血清学诊断指标。酶联免疫法所采用的的是抗原-抗体的特异性免疫反应，较目前临床上所使用的诊断方法特异性较高，重复性好，试剂稳定，敏感性好，不需特殊仪器设备，目前是临床检测的一个重要方法。

实用新型内容

本实用新型目的在于：提供一种检测人血清中炎症性肠病相关抗体的ELISA试剂盒，为炎症性肠病的诊断和鉴别诊断提供一种特异性血清学指标，以提高诊断的准确性。

为实现上述目的，本实用新型所采取的技术方案是：提供一种检测人血清中炎症性肠病相关抗体的ELISA试剂盒。试剂盒由一块包被有特异靶抗原的96孔酶标板、6个已知浓度的抗体溶液、阴阳性对照品、酶标二抗液、显色液A、显色液B、终止液、浓缩洗涤液、样品稀释液、封板膜、锡箔袋、产品说明书和产品质检报告。试剂盒采用间接竞争ELISA方法，检测时，在相应的反应孔中加入阴阳对照和待测样品，若样品中含有炎症性肠病相关的特异性抗体，则与微孔表面的靶抗原结合而形成抗原-抗体复合物。充分洗涤后加入酶标第二抗体。连接在第二抗体上的酶催化加入的酶底物使反应液呈现蓝色。在终止液的存在下蓝色液体改变为黄色。颜色的深浅与样品中抗体的含量成正相关。

所述酶标板是由外框支撑架及放置其上的可拆的12条酶标反应微孔条组成，每个可拆装酶标反应微孔条本身构成了独立的检测单位。每个反应微孔条有8个反应孔，每个反应孔预包被了特异靶抗原。

所述封板膜是可粘贴塑料膜，大小与酶标板横切面大小一致。

所述试剂盒中的预装试剂可以进行满足96样本量测定（包括标准品及阴阳性对照品）。即可一次满板大样本量检测，也可以通过可拆卸微孔板条分批多次检测。由于用户临床样本量多少不同，这一特征为客户提供了多次检测的方便条件。同时铝箔袋一端胶封拉链式合口可以反复操作，因此保证了未使用板条的效期内存放。检测时，待检血清中目标抗体与包被抗原发生抗原-抗体反应，加入标记有辣根过氧化物酶（HRP酶）的第二抗体形成抗原-抗体-抗体结合物，用TMB（3,3’,5,5’-四甲基联苯胺）底物显色，待检血清中抗体含量与底物显色后的光吸光（OD值）成线性关系。根据试剂盒包含的标准曲线将待测样本的OD值代入根据标准曲线得到的方程式计算出待测样本中的抗体含量。

根据方法验证程序，本试剂盒标准品浓度与OD值的相关曲线的线性回归系数（R²值）大于或等于0.990，灵敏度小于或等于0.5U/ml，批内差小于10%。本试剂盒操作无需特殊实验仪器，仅需酶标仪、移液器、振荡器等实验室基本仪器。试剂盒附有操作说明书，操作简便快捷。

本实用新型的优点是：检测人血清中炎症性肠病相关抗体的ELISA试剂盒灵敏度高、检测快速并可量化，稳定性好，可同时对多个样本进行检测，检测样本所需要的时间短，操作简便，不需要特殊实验仪器设备，可广泛应用于实验室检测。

附图说明

图1为本实用新型的结构示意图；

图2为本实用新型的试剂摆放位置示意图；

图3为本实用新型可拆酶标板俯视图；

图4为本实用新型盖板膜平面图；

图中：1、盒体；2、试剂固定件；3、包被特异靶抗原的酶标板；4、封板膜；5、标准品；6、阳性质控品；7、阴性质控品；8、显色液A；9、显色液B；10、酶标抗原工作液；11、样品稀释液；12、洗涤液；13、终止液。

具体实施方式

以下通过实施例和附图详细说明本实用新型的技术方案，并不以此限定本实用新型的实施范围。凡依照本实用新型披露内容所进行的本领域等同替换，均属于本实用新型的保护范围。