[发明专利]一种合成Etelcalcetide的方法

说明书

本发明涉及医药合成领域，公开了一种合成Etelcalcetide的方法。本发明所述方法采用固相合成的策略，先合成Etelcalcetide主链肽树脂，再脱除肽链中Cys的侧链保护基，而后以2,2’‑二硫二吡啶活化肽树脂上Cys侧链的巯基并与L‑Cys构建二硫键，经裂解得到Etelcalcetide粗肽，整个过程不用经过多步纯化，所获粗肽收率和纯度较高，且纯化后精肽的总收率大幅提高。

技术领域

本发明涉及医药合成领域，具体涉及一种合成Etelcalcetide的方法。

背景技术

继发性甲状旁腺功能亢进(SHPT，简称继发性甲旁亢)，是指在慢性肾功能不全、肠吸收不良综合征、Fanconi综合征和肾小管酸中毒、维生素D缺乏或抵抗以及妊娠、哺乳等情况下，甲状旁腺长期受到低血钙、低血镁或高血磷的刺激而分泌过量的甲状旁腺激素(PTH)，以提高血钙、血镁和降低血磷的一种慢性代偿性临床表现，长期的甲状旁腺增生最终导致形成功能自主的腺瘤。

Etelcalcetide是由Kai Pharmaceuticals,Inc.开发的一种新颖的拟钙剂(calcimimetic agent)，能够抑制甲状旁腺激素(PTH)的分泌。继发性甲旁亢(SHPT)是接受透析治疗的慢性肾脏病(CKD)患者中一种常见且严重的代偿失调疾病。目前已知，持续升高的甲状旁腺激素(PTH)与CKD患者的关键临床结局相关。Etelcalcetide可结合并激活甲状旁腺上的钙敏感受体，实现甲状旁腺激素(PTH)水平的降低。

Etelcalcetide有3个D构型的精氨酸、2个D构型的丙氨酸、1个D构型的精氨酰胺、1个D构型半胱氨酸与1个L构型半胱氨酸(N段被乙酰基封闭)构成，其中D构型半胱氨酸与L构型半胱氨酸以二硫键连接在一起(N-acetyl-D-cysteinyl-D-alanyl-D-arginyl-D-arginyl-D-arginyl-D-alanyl-D-Argininamide,disulfide with L-cysteine)，其结构如下所示：

专利CN201080045024.9首度报道了该化合物，但是未见该化合物的合成工艺报道。该化合物合成的关键在于分子间二硫键的构建，常规的分子间二硫键构建一般需要先将两个肽片段进行纯化制备，然后活化其中一个巯基，纯化制备后再与另一巯基进行反应形成二硫键，最后纯化制备后得到相应的产物。但是该方法的反应步骤比较繁琐，需要进行多步纯化制备，生产成本相应较高，且最后的总收率较低。

发明内容

有鉴于此，本发明的目的在于提供一种合成Etelcalcetide的方法，使得所述方法无需多步纯化即能获得较高纯度和收率的粗肽产品，同时提高精肽的总收率。

为实现上述目的，本发明提供如下技术方案：

一种合成Etelcalcetide的方法，包括以下步骤：

步骤1、固相合成在SEQ ID NO:1所示氨基酸序列D-Cys侧链上、D-Arg侧链上偶联有保护基，且在SEQ ID NO:1所示氨基酸序列C端偶联有氨基树脂以及在N端乙酰化的肽树脂片段A；

步骤2、脱除肽树脂片段A中D-Cys侧链保护基，获得肽树脂片段B；

步骤3、用2,2'-二硫二吡啶活化肽树脂片段B中D-Cys侧链巯基，获得肽树脂片段C；

步骤4、N端偶联有保护基的L-Cys与肽树脂片段C在偶联体系作用下进行偶联反应构建二硫键，获得全保护肽树脂，加入裂解液脱除所有保护基以及氨基树脂获得Etelcalcetide粗肽，粗品可直接用乙醚沉淀出。