[发明专利]一种日本枫猩猩的组培快繁方法

说明书

本发明公开一种日本枫猩猩的组培快繁方法，包括以下步骤：(1)外植体选取及灭菌：切取日本枫猩猩带芽茎段，采用酒精和升汞灭菌处理后，得外植体；(2)启动培养：将步骤(1)所得外植体接种到启动培养基中培养1—4周，腋芽生成；(3)增殖培养：切取步骤(2)所得腋芽，接种到增殖培养基中培养4—6周，丛生芽生成；(4)生根培养：将步骤(3)所得丛生芽分离成单芽，接种到生根培养基中培养3—4周即得日本枫猩猩无菌苗；所用培养基配方简单，组培流程简便，培养时间短，增殖频率高，幼苗整齐，便于后期统一的移栽和种植管理，降低了人工成本，能保证所长出的幼苗植株在形状上的一致性，易于操作，可进行产业化生产。

技术领域

本发明涉及生物组培育苗技术领域，具体涉及一种日本枫猩猩的组培快繁方法。

背景技术

日本枫猩猩，其拉丁名为Acer palmatum‘Desho jo’，春天叶子呈鲜亮的胭脂红，但颜色持续时间没有其他相似品种长，除春天外，叶子在其他季节都呈浅绿色，通常边缘是铜红色，而秋天变为深红色。其植株大多低矮，枝条层叠状犹如瀑布，成龄植株，其冠伞形或半球形，植株健壮，生长旺盛。虽然该品种目前没有广泛栽植，但它将会成为一个很受欢迎的园林景观树种，极具观赏价值与经济价值。然而该品种数量少，目前主要通过播种和嫁接繁殖，出芽率和成活率都不是很高，繁殖系数低，繁殖周期长，场地要求大，人工成本较高，远不能满足国内对种苗的需求。

因此，如何提高其生产效率，缩短培育时间，降低人工成本，保持优良树种的遗传稳定性，提高其繁殖系数成为目前亟待解决的问题。

发明内容

有鉴于此，本申请提供一种日本枫猩猩的组培快繁方法，所用培养基配方简单，组培流程简便，培养时间短，增殖频率高，幼苗整齐，便于后期统一的移栽和种植管理，降低了人工成本，能保证所长出的幼苗植株在形状上的一致性，易于操作，可进行产业化生产。

为解决以上技术问题，本发明提供的技术方案是一种日本枫猩猩的组培快繁方法，包括以下步骤：

(1)外植体选取及灭菌：切取日本枫猩猩带芽茎段，采用酒精和升汞灭菌处理后，得外植体；

(2)启动培养：将步骤(1)所得外植体接种到启动培养基中培养1—4周，腋芽生成，所述启动培养基的组成为：N6基本培养基，补充0.05—0.20mg/L NAA、0.01—0.08mg/LTDZ、10—50g/L蔗糖、2—10g/L琼脂；

(3)增殖培养：切取步骤(2)所得腋芽，接种到增殖培养基中培养4—6周，丛生芽生成，所述增殖培养基的组成为：N6基本培养基，补充0.05—0.20mg/L NAA、0.05—0.20mg/LTDZ、0.2—1.2mg/L 6-BA、200—600mg/L LH；

(4)生根培养：将步骤(3)所得丛生芽分离成单芽，接种到生根培养基中培养3—4周即得日本枫猩猩无菌苗，所述生根培养基的组成为：1/4N6基本培养基，补充0.01—0.05mg/L IAA、0.01—0.08mg/L NAA、0.005—0.02mg/L IBA。

优选的，所述外植体选取及灭菌的具体操作为：选取日本枫猩猩幼嫩枝条，去掉叶片，切割成长度为2—3cm的带芽茎段，在无菌操作台上，用75％的酒精处理6—10s，再用0.1％的升汞处理6—10min，无菌水冲洗4—6次，晾干即可。

优选的，所述启动培养基的组成为：N6基本培养基，补充0.05—0.15mg/L NAA、0.03—0.06mg/L TDZ、20—40g/L蔗糖、3—6g/L琼脂。

更为优选的，所述启动培养基的组成为：N6基本培养基，补充0.1mg/L NAA、0.05mg/L TDZ、30g/L蔗糖、5g/L琼脂。