[发明专利]一种筛选用于促进植物吸收重金属的根系共生菌的方法

权利要求书

1.筛选用于促进植物吸收重金属的根系共生菌的方法，其特征在于，包括如下步骤：

(1)获取样品：以在重金属污染严重的土壤中生长良好的植物样品的完整根系以及根系周围的土壤为样品；

(2)菌体富集：将采集的样品剪碎后加入富集瓶中，所述富集瓶盛装有含有固相吸附载体、重金属化合物和制霉菌素的液体培养基，所述固相吸附载体用于吸附根系所带的细菌；

(3)菌种初筛：摇床培养所述富集瓶，将经摇床培养后的富集瓶中的固相吸附载体取出，置于含有重金属化合物的无菌固体培养基上，长出单菌落后，分离单菌落，单独培养获得单菌落菌液；

(4)菌种复筛：将所述单菌落菌液和重金属化合物加入到水培植物的根部培养液中共培养，检测水培植物体内的重金属含量，比对照的重金属含量高的处理所对应加入的单菌落菌液即为促进重金属土壤植物修复的根系共生菌。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述固相吸附载体选用活性炭、稻壳、珍珠岩或玉米秸秆中的一种或多种，使用比例参照：150ml的三角瓶中投入5-20g。

3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述重金属化合物选自氯化锌、硫酸锌、氯化铜中的一种或多种，其在所述液体培养基、所述固体培养基以及水培植物的根部培养液中的浓度为样品采集地污染土壤中重金属浓度的8～12倍。

4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，每100ml所述液体培养基中添加4～6mg所述制霉菌素。

5.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述摇床培养条件为：温度30℃，转速150～180r/min，培养30～60天；所述将经摇床培养后的富集瓶中的固相吸附载体取出指培养过程中每5天将富集瓶中50％的固相吸附载体转移到新的所述富集瓶中培养，取出经富集培养的最后一个富集瓶中的固相吸附载体。

6.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述菌种复筛步骤中的共培养条件：30℃，60r/min摇床培养30～60天。

7.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述水培植物为绿萝或彩叶草。

8.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，还包括在菌体富集之前对采集的样品采用无菌水进行初步冲洗。

9.根据权利要求1-8任一所述的方法，其特征在于，

所述液体培养基的配方为：蛋白胨10.0g，牛肉浸膏3.0g，氯化钠5.0g，蒸馏水1000ml，pH为7.2±0.2；

所述固体培养基的配方为：蛋白胨10.0g，牛肉浸膏3.0g，氯化钠5.0g，琼脂20g，蒸馏水1000ml，pH为7.2±0.2。