[发明专利]合成多核苷酸文库

权利要求书

1.编码框架可变性的轻链可变区的合成多核苷酸文库,其中所述轻链可变区的所述框架可变性包含:

(a)在位4和49中的一个或一个以上位置变化的VK1-05序列；

(b)在位4和49中的一个或一个以上位置变化的VK1-12序列；

(c)在位4和66中的一个或一个以上位置变化的VK1-33序列；

(d)在位4和49中的一个或一个以上位置变化的VK1-39序列；

(e)在位46和49中的一个或一个以上位置变化的VK2-28序列；

(f)在位4和36中的一个或一个以上位置变化的VK3-11序列；

(g)在位4和49中的一个或一个以上位置变化的VK3-15序列；

(h)在位4和49中的一个或一个以上位置变化的VK3-20序列；以及

(i)在位4和49中的一个或一个以上位置变化的VK4-1序列；

其中所述轻链可变区的变化如下：

位4：种系M为不变或改变为L；或种系L为不变或改变为M；

位36：种系Y为不变或改变为F或H；种系F为不变或改变为Y或H；或种系H为不变或改变为Y或F；

位46:种系L为不变或改变为V；或种系V为不变或改变为L；

位49：种系Y为不变或改变为S、F或H；种系S为不变或改变为Y、F或H；种系F为不变或改变为Y、S或H；或种系H为不变或改变为Y、S或F；

位66:种系G为不变或改变为R或E；种系R为不变或改变为G或E；或种系E为不变或改变为G或R。

2.权利要求1所述的文库，其中所述文库包含多核苷酸，所述多核苷酸编码轻链可变区，所述轻链可变区包含多肽序列，所述多肽序列与表3中提供的轻链多肽序列相比，具有100％的序列同一性。

3.合成多核苷酸的文库，所述多核苷酸编码轻链可变区，其中所述轻链可变区的多肽序列在Kabat编号系统定义的位89至94之间的2个或3个残基上是可变的，其中所述文库包含多核苷酸，所述多核苷酸编码轻链可变区的多肽，其由在表5-7中提供的所述多核苷酸的序列翻译制备。

4.合成多核苷酸的文库，所述多核苷酸编码轻链可变区，其根据Chothia-Lesk编号系统，在所述轻链可变区的CDRL1和/或CDRL2内部的一个或多个位点变化如下:

位28:种系S或G改变为G,A,或D；

位29:种系V改变为I；

位30:种系S改变为N,D,G,T,A,或R；

位30A:种系H改变为Y；

位30B:种系S改变为R或T；

位30E:种系Y改变为N；

位31:种系S改变为D,R,I,N,或T；

位32:种系Y或N改变为F,S,或D；

位50:种系A,D,或G改变为G,S,E,K,或D；

位51:种系G或A改变为A,S,或T；

位53:种系S或N改变为N,H,S,K,或R；以及

位55:种系E改变为A或Q。

5.权利要求1、3和4中任一项所述的文库，进一步包括编码重链可变结构域多肽的多核苷酸。

6.权利要求5所述的文库，其中所述轻链可变区或结构域多肽和所述重链可变结构域多肽的形式为完整轻链和/或完整重链。

7.一种由权利要求1、3和4中任一项所述的文库产生的多肽表达产物。

8.一种通过在宿主细胞中表达权利要求1、3和4中任一项所述的文库制备目标抗体的方法。

9.一种载体的文库，其包含权利要求1、3和4中任一项所述的文库。

10.一种宿主细胞的文库，其包含权利要求9所述的载体的文库。

11.权利要求10所述的宿主细胞的文库，其中所述宿主细胞为酵母细胞。