[发明专利]吴茱萸有效成分提取物、制备方法及其应用

说明书

技术领域

本发明属中药制药领域，具体涉及一种吴茱萸生物碱制备方法及其活性物质在治 疗偏头痛药物中的应用。采用现代生产技术和药物经济学来实现其低成本、易于工业化的 制备工艺，以保证最低成本、最大效益地满足临床治疗上对药效物质的需求。

背景技术

吴茱萸为常用中药,始载于《神农本草经》、《中国药典》2005年版一部收载的吴茱 萸为芸香科植物吴茱萸、石虎及疏毛吴茱萸的干燥近成熟果实。具有散寒止痛、降逆止呕、 助阳止泻功能。吴茱萸所含化学成分类型较多,包括生物碱、苦味素、萜类、黄酮、香豆精、甾 体、挥发油、木脂素、多糖等。

吴茱萸内酯、吴茱萸碱和吴茱萸次碱为《中国药典》2010年版收录的吴茱萸质量控 制指标，相关测定表明去氢吴茱萸碱和绿原酸的含量大于吴茱萸碱和吴茱萸次碱，也为吴 茱萸中的主要成分，且现代药理学实验表明去氢吴茱萸碱具有神经保护、抗老年痴呆、抗健 忘和体温调节等生理活性，绿原酸具有显著的抗氧化、抗炎和抑菌等活性，因此在对吴茱萸 进行质量控制时有必要对去氢吴茱萸碱和绿原酸的含量进行监测。

目前吴茱萸的提取方法还比较落后，且提取物中的组成成分和相关药效不尽相 同。传统汤洗法，相关实验表明汤洗7遍后，吴茱萸中极性成分绿原酸的含量显著下降，而生 物碱类成分去氢吴茱萸碱、吴茱萸碱和吴茱萸次碱的总量和吴茱萸内酯的含量增大。大孔 树脂精制技术、梯度乙醇洗脱液合并或甲醇超声提取等方法，不但具有能耗低、单级分离效 果高、工艺简单，而且用于中药分离、纯化时所得制品收率高、纯度好。

发明内容

本发明提供了一种吴茱萸生物碱和柠檬酸苦素提取物，该提取物中有效成分如吴 茱萸碱、异鼠李素和柠檬苦素分子量在100-500D。

本发明还提供了制备上述吴茱萸有效物质提取物的方法，其步骤如下：

1.称取吴茱萸；

2.用相当于药材10倍量的水浸泡，回流提取趁热用纱布过滤，重复回流提取一次， 合并提取后的滤液；

3.减压浓缩制成干膏或冻干成粉；

4.加沸水捏溶。取上清液过HPD-100大孔树脂柱,分别用浓度为10％,30％,50％, 95％乙醇(各4倍柱体积)洗脱,60％以下回收乙醇,将30％,50％乙醇洗脱部分合并；

5.置孔径500D的透析袋内，外套孔径100D的透析袋，扎口。将其浸泡在双蒸馏水烧 杯，在4℃静置48小时。分别收集500D袋内(>500D部分)，100D和500D之间(100-500D部分)， 以及烧杯内(<100D部分)的液体。

本发明还利用高效液相色谱对不同时间透析处理过的部分化学成分进行分析，采 用KromasilC₁₈(250mm×4.6mm，5μm)色谱柱，吴茱萸碱流动相为乙腈∶水(49∶51)，225nm检 测；柠檬苦素流动相为乙腈∶水(36∶64)，207nm检测，流速均为1.0mL/min。将各测试成分有 效峰面积(峰高∶峰宽≥10)代入各自的线性方程，计算各成分含量。所得数据Excel软件处 理。每样本含量平行做3份，取平均值。在100D-500D之间，检测出吴茱萸碱、异鼠李素和柠檬 苦素的含量分别为14.4％、3.12％和4.91％。

本发明以热板法中小鼠添足时间作为疼痛阈值，以此为药理指标，确定了吴茱萸 中具有镇痛作用的生物碱和柠檬苦素分子量范围为100D-500D.

本发明确定了具有治疗厥阴头痛的吴茱萸生物碱和柠檬酸苦素的分子量范围，针 对目前生物碱和柠檬酸苦素常规提取分离方法的缺点，建立一种低成本、易于工业化生产、 简便高效的酸枣仁汤生物碱和柠檬酸苦素的制备方法。

具体实施方式

实施例1:吴茱萸提取物的制备