[发明专利]一种检测牙周病相关蛋白的抗体芯片试剂盒

说明书

本发明涉及生物检测技术领域，具体地，涉及一种检测牙周病相关蛋白的抗体芯片试剂盒。该试剂盒的抗体芯片以含有烷基糖苷的亲水试剂处理的玻片作为固相载体，且多种牙周病相关蛋白的特异性抗体混合物在22～24℃、30～40%的湿度条件下点样到固相载体上。本发明的试剂盒能够检测多个临床常用的牙周病相关蛋白，克服了现有技术操作繁琐、检测指标单一、灵敏度低等缺陷，具有廉价、便利、灵敏、准确、高通量、标本用量少、能在普通实验室推广和规模化等优点。

技术领域

本发明涉及生物检测技术领域，具体地，涉及一种检测牙周病相关蛋白的抗体芯片试剂盒。

背景技术

牙周病是指发生在牙支持组织(牙周组织)的疾病，包括仅累及牙龈组织的牙龈病和波及深层牙周组织(牙周膜、牙槽骨、牙骨质)的牙周炎两大类。牙周疾病是常见的口腔疾病，是引起成年人牙齿丧失的主要原因之一，也是危害人类牙齿和全身健康的主要口腔疾病。牙周病的早期症状不易引起重视，造成牙周组织长期慢性感染，炎症反复发作，不仅损害口腔咀嚼系统的功能，还会严重影响健康。

牙周病是从简单的牙龈发炎到软组组和牙齿骨组织损害的疾病，在最坏的情况下会导致牙齿的脱落。因此牙周炎的早期诊断和预防至关重要。目前包括牙周袋探诊，牙菌斑和X光片影像学诊断在内的临床检测可作为牙周病症状的指标，但这些检测不能指示疾病的发展情况。因此有必要开发一种新的检测方法反映疾病的状况，有效地预防和监测疾病的发生。龈沟液(GCF)是指通过沟内上皮和结合上皮从牙龈结缔组织渗入到龈沟内的液体。牙龈健康者有极少量龈沟液，由组织内的渗透梯度而使组织液渗入龈沟内。因为龈沟液中通常有炎症细胞，其他化学成分与组织液也不完全相同；龈沟液的流出量与该部位的炎症程度成正比。龈沟液的液体成分主要来源于血清，其他成分则分别来自血清、邻近的牙周组织及细菌。龈沟液包括各种电解质、蛋白质、葡萄糖、酶等，也含有白细胞、脱落的上皮细胞等，还有细菌及其他微生物。龈沟液中含有多种酶，其中天冬氨酸转氨酶、碱性磷酸酶、胶原酶等与牙周病的严重程度和活动期有一定关系。龈沟液量增多是牙龈炎早期的主要表现之一，常早于临床表征的改变。牙龈炎症明显时，龈沟液明显增多。龈沟液可以通过无创手段如试纸条进行采集检测，因此龈沟液中的蛋白可作为理想的标志物用于疾病的检测。牙周病相关蛋白包括炎症细胞因子(例如IL-1β，IL-6，IL-8，IL-10，IL-12，IFNG，TNFa和CRP)，骨代谢相关的细胞因子(例如，OPG，OPN，RANK，RANKL和)和酶(例如碱性磷酸酶和天冬氨酸转氨酶)。

检测牙周病的常用方法包括通过测量牙周袋的探诊深度、诊察附着在牙槽骨上的牙齿的X光照片并参考探诊出血。上述方法各有优缺点，在实际应用中，根据各自的实验目的和实验室条件进行选择。这些方法严重依赖于牙科医生的主观鉴定。探诊深度仅仅是对过去的附着丧失的测量，其在现在发生的牙周炎或其未来的发展中帮助很小。探诊出血能够表明复原过程而不是破坏过程。最近，虽然也开发了许多评估牙周病活动性的方法。然而，上述方法中没有一种提供了足够灵敏和特异的试验以诊断牙周炎及其破坏模式。非特异性方法的一个结果是几个实际没有患牙周炎的患者将被治疗。临床观察例如探诊深度不够可靠，因为深的牙周袋不是必然包含正在发生的炎症，X光线照相术评估必须结合详细的临床观察以给出正确的诊断，仅仅是在牙周袋中存在病原菌不能准确地反映疾病活动性。而且迄今为止开发的基于检测宿主或细菌来源蛋白质的酶学方法的诊断还不够特异的，因为免疫学检测法比较简单，迅速，重复性好，但假阳性率高，每次只能检测一个相关蛋白。

有鉴于此，有必要开发一种新型的牙周病相关蛋白检测试剂盒，以克服现有技术中亟待解决的问题，实现多种目标蛋白的高通量、高灵敏度、高特异性和低成本检测。

发明内容

本发明的目的是为了克服现有技术的不足，提供一种检测牙周病相关蛋白的抗体芯片试剂盒，该试剂盒能同时检测多个牙周病相关蛋白，克服了现有技术操作繁琐、检测指标单一、灵敏度低等缺陷，具有廉价、便利、灵敏、准确、高通量、标本用量少、能在普通实验室推广和规模化等优点。。

为了实现上述目的，本发明是通过以下技术方案予以实现的：