[发明专利]用于筛选小麦抗叶锈病QTL的引物及其应用有效
| 申请号： | 201510985356.X | 申请日： | 2015-12-25 |
| 公开（公告）号： | CN105385772B | 公开（公告）日： | 2018-08-31 |
| 发明（设计）人： | 周悦;崔彬彬;贾晓梅;曹柳青;靳茜;郝征 | 申请（专利权）人： | 保定学院 |
| 主分类号： | C12Q1/6895 | 分类号： | C12Q1/6895;C12N15/11 |
| 代理公司： | 石家庄国为知识产权事务所 13120 | 代理人： | 李瑞妍 |
| 地址： | 071000 河北*** | 国省代码： | 河北;13 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 用于 筛选 小麦 叶锈病 qtl 引物 及其 应用 | ||
1.用于筛选小麦抗叶锈病QTL的引物的应用，其特征在于，所述QTL位于2DS染色体，标记区间为Xgwm261-Xgwm484，来自于感病亲本Thatcher；所述引物是由引物wms261和wms484的上下游核苷酸序列组成的引物对；所述引物wms261的上游序列为：5'CTCCCTGTACGCCTAAGGC 3'，下游序列为：5'CTCGCGCTACTAGCCATTG 3'；所述引物wms484的上游序列为：5'ACATCGCTCTTCACAAACCC 3'，下游序列为：5'AGTTCCGGTCATGGCTAGG 3'；所述引物在筛选小麦抗叶锈病QTL中的应用。
2.根据权利要求1所述的用于筛选小麦抗叶锈病QTL的引物的应用，其特征在于：所述小麦抗叶锈病QTL为QTL-QLr.hebau-2DS；以待测小麦基因组DNA为模板，分别在引物wms261和wms484的引导下进行PCR扩增，再对扩增产物进行检测；当用wms261扩增的产物有164bp条带，并且用wms484扩增的产物有143bp条带时，则待测小麦含有小麦抗叶锈病QTL-QLr.hebau-2DS；当用wms261扩增的产物有194bp条带，并且用wms484扩增的产物有153bp条带时，则待测小麦不含有小麦抗叶锈病QTL-QLr.hebau-2DS。
3.根据权利要求2所述的用于筛选小麦抗叶锈病QTL的引物的应用，其特征在于，所述的PCR扩增：
10μL PCR反应体系为：10×buffer 1μL、10mmol L-1dNTP 0.2μL、4μmol L-1引物1μL、30ngμL-1DNA模板1μL、Taq酶0.5U、ddH2O 6.7μL；
PCR反应程序为：94℃预变性5min；94℃变性45sec，55℃退火45sec，72℃延伸45sec，35个循环；最后72℃延伸10min，10℃保存，PCR结束后在每个反应体系中加入2.5μL 6×Loading buffer。
4.根据权利要求2或3所述的用于筛选小麦抗叶锈病QTL的引物的应用，其特征在于，所述的对扩增产物进行检测是：对扩增产物在12％w/v的非变性聚丙烯酰胺凝胶中进行电泳分离，然后银染显色。
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