[发明专利]一株有效促进作物生长的海水芽孢杆菌L-60及其应用在审
申请号: | 201510982083.3 | 申请日: | 2015-12-24 |
公开(公告)号: | CN105462898A | 公开(公告)日: | 2016-04-06 |
发明(设计)人: | 沈其荣;李荣;刘小玉;张瑞福;高旭;王甜甜 | 申请(专利权)人: | 南京农业大学;南京农业大学淮安研究院 |
主分类号: | C12N1/20 | 分类号: | C12N1/20;A01N63/00;A01P21/00;C12R1/07 |
代理公司: | 南京天华专利代理有限责任公司 32218 | 代理人: | 傅婷婷;徐冬涛 |
地址: | 211225 江苏省南京市溧*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 有效 促进 作物 生长 海水 芽孢 杆菌 60 及其 应用 | ||
技术领域
本发明属于农业微生物领域,具体涉及一株有效促进作物生长的海水芽孢杆菌L-60及其应用。
背景技术
植物根际促生菌(PlantGrowth-promotingRhizobacteria,PGPR)是指存在于植物根际表面及根系周围土壤微环境中,能通过直接或间接的方式显著促进植物生长的微生物(Ahmadetal,2008)。通常根际促生菌最显著的促生能力是能分泌植物激素,研究较多的为吲哚乙酸(Indole-3-aceticacid,IAA),IAA通过促进细胞的伸长和有丝分裂促进植物生长(Glicketal,1998),并且IAA能溶解土壤中难溶的磷,提高作物对土壤中磷的吸收(李海宗等,2014)。从根际分离获得高效促生菌株,成为微生物肥料领域的热点。目前,尚未见Bacillusaquimaris能够分泌IAA,促进植物生长方面的相关报道。
发明内容
本发明的目的在于针对生产实践中的实际问题和需求,提供一株有效促进作物生长的海水芽孢杆菌L-60。
本发明的另一目的是提供该细菌的应用。
本发明的又一目的是提供该细菌制备的生物肥料及其应用。
本发明的目的可通过以下技术方案实现:
一株用于促进作物生长的促生菌株L-60,分离自甘肃马铃薯长期定位点的马铃薯根际,分类命名为海水芽孢杆菌(Bacillusaquimaris),保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心,保藏日期为2015年1月7日,保藏编号为CGMCCNo.10285。
菌株L-60在LB平板上呈饱满突起规则圆形,表面光滑,淡黄色。革兰氏染色阳性,接触酶和利用柠檬酸盐反应呈阳性,硝酸盐还原呈阳性,可水解明胶,不耐受10%NaCl。菌株16SrDNA序列构建的系统发育树分析表明,菌株L-60位于Bacillusaquimaris分支上,结合生理生化试验将L-60鉴定为海水芽孢杆菌。
本发明所述海水芽孢杆菌L-60在产植物激素IAA和/或促进植物生长中的应用。
本发明所述海水芽孢杆菌L-60在制备促进植物生长的生物肥料中的应用。
由本发明所述海水芽孢杆菌L-60制备的生物肥料。
所述的生物肥料优选主要通以下方法制备:将保藏号为CGMCCNo.10285的海水芽孢杆菌L-60接种到PDA液体培养基中,进行液体发酵生产,发酵生产的条件为:pH6.0~7.0,发酵温度范围30~35℃,搅拌速度为170~200转/分钟,发酵时间为48h,使发酵液中含菌量≥1×1010个/mL。所用PDA培养液配制方法为,以配制1L培养基为例:用200g土豆削皮后切成小块放到水里煮,沸腾后煮30min,经过滤后滤液中加20g普通蔗糖,定容至1000ml,pH值调至7.2-7.4,121℃灭菌20min。
所述的生物肥料进一步优选将得到的发酵液按照常规方法制备为其他的生物肥料常用剂型,优选制备为粉剂、颗粒剂或悬浮剂。
本发明所述的生物肥料在产IAA和/或促进植物生长中的应用。
所述的应用,优选将所述的发酵液直接加至植物根际,或将所述的发酵液6000~8000r/min离心8~10min后,采用与发酵液体积相等的生理盐水(浓度0.9%)重悬菌体制备成菌悬液,然后直接加至植物根际。以降低成本为基准,发酵液或菌悬液的灌菌量优选按菌液体积与土壤重量比为20~30mL·kg-1来施用,进一步优选按照25mL·kg-1来施用。
有益效果:
本发明主要利用分离筛选出的能够高产IAA和根际有效定植的海水芽孢杆菌的施用,显著提高作物苗期的生长速度,促进作物对土壤中养分的吸收利用,从而促进作物生长。本发明促生菌L-60在多季盆栽试验中表现出的稳定促生能力。本发明生物肥料应用后促生效果明显,适合蔬菜作物产区大面积使用。
附图说明
图1基于菌株L-60的16SrDNA基因序列采用邻接法建立的系统发育树
图2第一季玉米盆栽效果图
图3第二季玉米盆栽效果图
图4第一季黄瓜盆栽效果图
图5第二季黄瓜盆栽效果图
图6第一季番茄盆栽效果图
生物材料保藏信息
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