[发明专利]一株枯草芽孢杆菌、发酵方法、粉剂和应用

权利要求书

1.一株枯草芽孢杆菌，其特征在于，所述枯草芽孢杆菌为枯草芽孢杆菌（Bacillus subtilis）Gv-1，保藏单位：中国典型培养物保藏中心，保藏地址：中国武汉武汉大学，保藏号：CCTCC NO：M2015766，保藏日期：2015年12月21日。

2.一种如权利要求1所述的枯草芽孢杆菌的发酵方法，其特征在于，将枯草芽孢杆菌接种于LB液体培养基中，恒温振荡培养，至OD₆₀₀达到1.0，得到枯草芽孢杆菌菌液，再将枯草芽孢杆菌菌液以1%的接种量接种于发酵培养基，37℃发酵24-72h。

3.根据权利要求2所述的枯草芽孢杆菌的发酵方法，其特征在于，所述发酵培养基的制备方法为：将海滨锦葵块根提取液和普通肉汤培养基按照体积比4-0.5:1的比例混合，得到混合培养液，再加入混合培养液总重量0.02%的(NH₄)₂SO₄和0.04%的NaOH，调节pH至9.0，121℃高压灭菌30min。

4.根据权利要求3所述的枯草芽孢杆菌的发酵方法，其特征在于，所述的海滨锦葵块根提取液的制备方法为：将海滨锦葵块根清洗、干燥并切块，加水煮沸3次，每次30min，过滤，合并三次煮沸滤液即得；其中，每次加水量为海滨锦葵块根重量3倍。

5.一种含有如权利要求1所述的枯草芽孢杆菌的粉剂，其特征在于，所述的粉剂的制备方法包括以下步骤：

（1）将枯草芽孢杆菌接种于LB液体培养基中，恒温振荡培养，至OD₆₀₀达到1.0，得到枯草芽孢杆菌菌液，再将枯草芽孢杆菌菌液以1%的接种量接种于发酵培养基，37℃发酵24-72h；

（2）将步骤（1）的枯草芽孢杆菌发酵液以12-18%的接种量接种于扩大培养培养基中，35-39℃、150-250r/min发酵48h；

（3）将步骤（2）的发酵液加入自动排渣碟式分离机中离心，得到菌泥，将菌泥和菌泥载体按照质量比1:2混合，再送入高效沸腾干燥机中烘干，最后用粉碎机粉碎即得。

6.根据权利要求5所述的粉剂，其特征在于，所述发酵培养基的制备方法为：将海滨锦葵块根提取液和普通肉汤培养基按照体积比4-0.5:1的比例混合，得到混合培养液，再加入混合培养液总重量0.02%的(NH₄)₂SO₄和0.04%的NaOH，调节pH至9.0，121℃高压灭菌30min；

所述的海滨锦葵块根提取液的制备方法为：将海滨锦葵块根清洗、干燥并切块，加水煮沸3次，每次30min，过滤，合并三次煮沸滤液即得；其中，每次加水量为海滨锦葵块根重量3倍。

7.根据权利要求5或6所述的粉剂，其特征在于，步骤（3）中发酵液加入自动排渣碟式分离机的流量为400L/h，高效沸腾干燥机的进风温度为70℃，烘干时间为3h。

8.一种含有权利要求5所述的粉剂的猪饲料，其特征在于，所述的猪饲料包括以下重量份的原料：玉米44份、豆粕45份、麦麸10份、枯草芽孢杆菌粉剂0.01-0.03份、预混料1份；所述的预混料为每10千克预混料中含有VA 5512 U、VD 640U、VK3 2.2U、VE 20U、VB12 27.6μg、VB2 5.5mg、D-泛酸14.8mg、烟酸30.3mg、胆碱500mg、铜50mg、铁100mg、锌50mg、锰10mg、碘0.85mg、硒0.25mg。

9.一种如权利要求1所述的枯草芽孢杆菌在促进植物生长和提高植物高盐浓度下抗逆性方面的应用。

10.一种如权利要求1所述的枯草芽孢杆菌在制备提高猪生产性能、吸收能力和调节肠道菌群的菌剂方面的应用。