[发明专利]一种肠膜明串珠菌的水不溶性胞外多糖的制备方法

说明书

本发明公开了一种肠膜明串珠菌的水不溶性胞外多糖的制备方法。所述制备方法包括以下步骤：1)将肠膜明串珠菌(Leuconostoc mesenteroides)BD3749接种于番茄汁蔗糖培养基中，发酵培养获得发酵液；2)将步骤1)所得发酵液冷冻干燥后，取粉末用碱液浸提，取上清，调节上清pH值至7，取沉淀，冷冻干燥即得。该制备方法所用番茄汁蔗糖培养基主要原料为番茄，其来源广、成本低、天然安全，在降低物料成本的同时，提高了食品安全性，发酵菌种为肠膜明串珠菌单一菌种，上述组合有利于产品品质的标准化与工业大规模生产的成本控制，其应用前景十分广阔。

技术领域

本发明属于生物技术领域，具体涉及一种肠膜明串珠菌的水不溶性胞外多糖的制备方法。

背景技术

水不溶性葡聚糖(Insoluble glucan，IG)是一类不溶于水、以葡萄糖为单一组分聚合而成的一种糖类多聚物，这类理化性质特殊的碳水化合物不但来源广泛，在植物、真菌以及细菌的代谢产物中均有报道，而且种类繁多。目前报道较多的IG有dextran、curdlan和cellulose三种，从结构特点来看，已报道的这些IG的分支仅由α-(1,2)、α-(1,3)或α-(1,4)糖苷键中的一种将支链与主链连接起来，极少涉及2种或以上糖苷键的分支结构。因此，新构型IG的筛选与发现不仅为IG家族增添了新的成员，而且极大地推动了IG结构有关研究的前沿领域。

此外，目前IG的获得都来自合成培养基，此类培养基成分多样，配方复杂，配制过程繁琐具有潜在食品安全风险，再者，制备的成本相对较高、IG的来源相对有限，上述问题很大程度上限制了IG的开发和利用。

发明内容

本发明为了解决目前水不溶性葡聚糖的制备使用的是成分多样，配方复杂的合成培养基存在的成本较高，培养基配制繁琐，存在食品安全风险等问题，提供了一种肠膜明串珠菌的水不溶性胞外多糖的制备方法。该制备方法所用番茄汁蔗糖培养基安全纯天然，配制简单，原料来源广泛，成本低。

本发明人发现保藏号为CGMCC No.100064的肠膜明串珠菌(Leuconostocmesenteroides)BD3749在番茄汁蔗糖培养基中振荡培养后的发酵液经冷冻干燥，碱液浸提，离心得到的上清液，再经酸液调节pH至7，离心取沉淀，冷冻干燥可获得具有特殊结构的水不溶性胞外多糖，从而完成了本发明。

为解决上述技术问题，本发明采取的技术方案是：一种肠膜明串珠菌的水不溶性胞外多糖的制备方法，所述制备方法包括以下步骤：

1)将肠膜明串珠菌(Leuconostoc mesenteroides)BD3749接种于番茄汁蔗糖培养基中，发酵培养获得发酵液；

2)将步骤1)所得发酵液冷冻干燥后，取粉末用碱液浸提，取上清，调节上清pH值至7，取沉淀，冷冻干燥即得。

本发明制备方法步骤1)为：将肠膜明串珠菌(Leuconostoc mesenteroides)BD3749接种于番茄汁蔗糖培养基中，发酵培养获得发酵液。

本发明步骤1)肠膜明串珠菌BD3749已于2014年11月26日保藏在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心(CGMCC)，保藏地址：北京市朝阳区北辰西路1号院3号，邮编：100101。该菌株的建议的分类命名为：肠膜明串珠菌Leuconostoc mesenteroides，该菌株的保藏编号为：CGMCC No.10064，所保藏的培养物名称为：BD3749。