[发明专利]壳聚糖气凝胶碱性培养基的制备和使用方法

说明书

本发明属于微生物培养领域，具体涉及一种壳聚糖气凝胶碱性培养基的制备和使用方法。所述制备方法包括以下步骤：将20.00质量份的壳聚糖溶于1000体积份的乙酸溶液中，旋转蒸发浓缩至100体积份，即壳聚糖乙酸溶液凝胶的浓度为20％；将得到的壳聚糖乙酸溶液倒入容器内，于‑20℃预冻24h，取出后在‑55℃冷冻干燥36h，即得到壳聚糖气凝胶碱性培养基。本发明提供了一种新型的碱性培养的制备和使用方法，该方法制备的培养基具有更大的比表面积，提供更多附着位点，更适于微生物生长，完成培养目标。

技术领域

本发明属于微生物培养领域，具体涉及一种壳聚糖气凝胶碱性培养基的制备和使用方法。

背景技术

壳聚糖又称脱乙酰甲壳素，是由自然界广泛存在的几丁质经过脱乙酰作用得到的，化学名称为β-聚葡萄糖胺(1-4)-2-氨基-D葡萄糖。其生物官能性和相容性、血液相容性、安全性、微生物降解性等优良性能被各行各业广泛关注，在医药、食品、化工、化妆品、水处理、金属提取及回收、生化和生物医学工程等诸多领域的应用研究取得了重大进展。壳聚糖在弱酸溶剂中易于溶解，特别值得指出的是溶解后的溶液中含有氨基(NH²⁺)，这些氨基通过结合负电子来抑制细菌。在中性及碱性条件下，壳聚糖没有明显的抑菌效果。但是同时壳聚糖又是较好的气凝胶的制备材料。气凝胶是一种固体物质形态，世界上密度最小的固体。气凝胶的种类很多，并且要求有高孔隙率、低密度。

培养基是供微生物、植物组织和动物组织生长和维持用的人工配制的养料，一般都含有碳水化合物、含氮物质、无机盐(包括微量元素)以及维生素和水等。不同培养基可根据实际需要，添加一些自身无法合成的化合物，即生长因子。根据其物理状态可分为液体培养基、固体培养基、半固体培养基及脱水培养基。

发明内容

为解决现有技术的缺点和不足之处，本发明的首要目的在于提供一种环保可降解、高效的壳聚糖气凝胶碱性培养基的制备方法。

本发明的另一目的在于提供上述制备方法制得的壳聚糖气凝胶碱性培养基的使用方法。

本发明目的通过以下技术方案实现：

一种壳聚糖气凝胶碱性培养基的制备方法，包括以下步骤：

将20.00质量份的壳聚糖溶于1000体积份的乙酸溶液中，旋转蒸发浓缩至100体积份，即壳聚糖乙酸溶液凝胶的浓度为20％；将得到的壳聚糖乙酸溶液倒入容器内，于-20℃预冻24h，取出后在-55℃冷冻干燥36h，即得到壳聚糖气凝胶碱性培养基。

所述乙酸溶液的质量浓度为2％。

所述旋转蒸发温度控制在75℃。

上述制备方法制得的壳聚糖气凝胶碱性培养基的使用方法，步骤如下：

(1)制备培养液：选择培养液，并添加葡萄糖4g/L～20g/L，牛肉膏4g/L～20g/L，用缓冲溶液调节pH，搅拌均匀，灭菌；

(2)接种培养：将菌种接种到步骤(1)中灭菌后的培养液中并在适宜温度、转速条件下培养30min；

(3)在无菌环境中，将一定体积的壳聚糖气凝胶碱性培养基浸泡在步骤(2)中接种培养后的培养液中，然后取出放置在灭菌后的培养皿中，在需要的温度下进行培养。

步骤(1)所述搅拌的时间为30min，所述灭菌的时间为30min，灭菌的温度为120min。

优选地，步骤(1)中使用的缓冲溶液为磷酸盐缓冲溶液。

优选地，步骤(1)中使用缓冲液调节培养液为碱性，pH值应与所需培养的微生物最适pH相吻合。

优选地，步骤(2)中所指的适宜温度、转速条件是指所需培养的微生物的适宜温度、转速条件。