[发明专利]一种包载紫杉醇胶束纳米簇及其制备方法

说明书

本发明属生物医药技术领域，涉及一种包载紫杉醇胶束纳米簇及其制备方法。本发明采用乳化超声法将制备的紫杉醇胶束(PTXPEG‑PLA micelles；PM)通过交联剂制备紫杉醇胶束纳米簇，最后加入亲水性带负电小分子中和表面正电荷并提高体系亲水性。本发明所述胶束纳米簇系统将紫杉醇包载在胶束的疏水内核中，在不影响原有胶束较高载药量的基础之上，有效地增大体系粒径并提高体系亲水性，延长体内循环时间，增加肿瘤EPR效应，从而提高该药临床应用的有效性和安全性。

技术领域

本发明属生物医药技术领域，涉及一种包载紫杉醇胶束纳米簇及其制备方法；所述包载紫杉醇胶束纳米簇为一种延长聚合物胶束体内循环时间并有效发挥肿瘤EPR效应的胶束纳米簇，可提高肿瘤治疗作用。

技术背景

现有技术公开了紫杉醇(PTX)是一线广谱抗肿瘤药物，通过促进纺锤体微管蛋白的聚合，抑制解聚，保持微管蛋白稳定，从而抑制肿瘤细胞有丝分裂过程，进而起到抗肿瘤作用，疗效显著；但其在水中的溶解度小于1ug/m。所述紫杉醇上市制剂主要是利用PEG-PLA胶束系统增加紫杉醇的给药剂量，两亲性材料在水溶液中能够形成具有球形的内核－外壳结构的共聚物胶束，其内核作为疏水性药物的容器，将紫杉醇增溶在内部，降低其毒副作用，外壳对药物起保护作用，使其不易被网状内皮系统吞噬，提高药物的稳定性，避免了传统制剂中增溶剂聚氧乙烯蓖麻油的使用，从而可明显降低紫杉醇注射液的过敏性、血液毒性，提高药物使用的安全性。但实践显示，所述较并没有增加肿瘤部位的相对药物蓄积，反而略少于且的体内循环时间较缩短，不能给紫杉醇到达肿瘤部位发挥疗效提供足够的时间。

研究显示，实体肿瘤具有增强渗透与滞留效应(EPR)，由于相对较强的毛细血管渗透性，纳米粒子在肿瘤组织的相对蓄积增加；然而，EPR效应的发挥对于纳米粒子的粒径有一定的限制。据报道，平均粒径10nm的紫杉醇胶束与游离的紫杉醇相比几乎没有显示出任何EPR效应；与平均粒径大于300nm或小于50nm 的纳米粒子相比，粒径为100nm和200nm的粒子显示出更高的蓄积；平均粒径为100nm的粒子显示出更长的体内循环以及相对低的单核巨噬细胞摄取量。虽然，所述紫杉醇PEG-PLA胶束具有该体系特有的优势，但由于大部分聚合物胶束的粒径较小(10～50nm)，不能有效发挥肿瘤EPR效应，因此，构建一种新型的聚合物胶束结构，即聚合物胶束纳米簇，在维持原有胶束结构不变的前提下，通过交联反应形成较大的亲水性聚合物骨架来承载胶束从而形成胶束聚集体，既可以保证胶束原有结构不变维持原有胶束的载药能力，又可以将体系粒径增大至 100nm左右来发挥肿瘤EPR效应，从而提高紫杉醇给药体系的有效性和安全性。

所述TPGS是一种非离子表面活性剂，可用作增溶剂、吸收促进剂、乳化剂、沉淀抑制剂以及作为药物的载体等被广泛应用于制剂研究中。当前有报道，TPGS 能够提高紫杉醇生物利用度，提高紫杉醇的治疗效果,以及作为p-gp抑制剂逆转肿瘤多药耐药。

所述聚乙稀亚胺(PEI)，是一种具有功能性的水溶性大分子，主要分为两种结构形式：树枝状和直线状；相对分子质量从数百至几十万不等，其大分子链上拥有大量的氨基，不仅为胶束提供了稳定存在的屏障，且使体系表面带上了正电荷和功能性基团，为纳米颗粒的表面多功能修饰提供了可行性。

发明内容

本发明的目的是提供一种包载紫杉醇胶束纳米簇；所述包载紫杉醇胶束纳米簇为一种新型的聚合物胶束结构，即聚合物胶束纳米簇；该纳米簇在保证原有聚合物胶束结构不变的基础之上，能有效地增大体系粒径，延长体内循环时间，增加肿瘤EPR效应，从而提高该药临床应用的有效性和安全性。

本发明所述包载紫杉醇胶束纳米簇，采用TPGS与PEI构建亲水性交联网状骨架，使聚合物胶束穿插其中从而增大体系粒径，并通过IgG中和表面正电荷并增加体系亲水性，制得包载紫杉醇胶束纳米簇；该包载紫杉醇胶束纳米簇的粒径为100nm左右；本发明中，取稀释后的胶束和包载紫杉醇胶束纳米簇溶液适量，滴加在覆盖碳膜的铜网上，2.0％磷钨酸负染，室温干燥后置于透射电镜下观察，粒径分别为15nm，100nm左右(分别如图1、图2所示)。