[发明专利]一种用淡水鱼制备胶原蛋白肽的方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种胶原蛋白肽的制备方法，特别是一种用淡水鱼制备胶原蛋白肽的方法。

背景技术

传统的胶原蛋白主要来源于猪、牛等陆生哺乳动物的皮、骨和肌脏中，但是由于疯牛病、口蹄疫等流行病的发生，对此种胶原蛋白的安全产生了质疑，与此同时，宗教问题与素食者对饮食的特殊需求，使得寻求一种新的高品质胶原蛋白来源成为急需解决的问题。因此，从水生动物中提取安全的、可以满足更多人需求的高品质胶原蛋白成为当今社会的研究热点。

我国淡水鱼产量居世界首位，淡水鱼加工工业随着淡水鱼产量的增长而快速发展。目前，淡水鱼加工过程仅局限于对鱼体肌肉的利用，而对鱼皮、鱼鳞等通常认为的下脚料加工利用甚少，绝大多数被抛弃。据统计，我国每年淡水鱼加工业的废弃物总量达到200万吨以上，其中鱼皮约占8％，即16万吨。这样既造成环境污染，又浪费了资源。为了充分合理的利用资源，出现了利用淡水鱼皮制备胶原蛋白的技术。早期多采用清水高温蒸煮法、酸水解法和碱水解法等，但上述方法都会破坏胶原蛋白、氨基酸等活性成分，提取率和纯度低，成品利用价值低。

发明内容

本发明的目的是提供一种用淡水鱼制备胶原蛋白肽的方法，先分别对鱼鳞和鱼皮进行预处理，再采用复合酶解技术，大大缩短了提取时间，制得质量好、提取率和纯度高的胶原蛋白。

一种用淡水鱼制备胶原蛋白肽的方法，具体步骤为：

(1)将淡水鱼鱼鳞用5-7倍重量的蒸馏水浸泡10-20h，过滤，滤液减压浓缩至原体积的3/4，加稀盐酸调节pH值为5-6，过滤，加入2-3倍鱼鳞重量的90％乙醇80-90℃加热回流30-60min，过滤，滤液加饱和石灰水调节pH值为7，500-1000r/min离心分离10-20min，取上清液，加0.03-0.05％上清液重量的中性蛋白酶和0.04-0.08％上清液重量的胶原蛋白酶，加热至100℃酶解20-30min，85℃灭酶5min，备用；

(2)将淡水鱼鱼皮用5倍重量的50％乙醇浸泡10-20h，过滤，滤液减压浓缩至原体积的3/4，加稀盐酸调节pH值为5-6，过滤，滤液以2BV/h的速率上AB-8大孔吸附树脂柱，先用50％7醇以2BV/h的速率洗脱，再用30％乙醇以2BV/h的速率洗脱，滤液、树脂柱、50％乙醇和30％乙醇的体积比为1∶1∶1.2-1.8∶1.2-1.8，收集洗脱液，加0.02-0.04％洗脱液重量的脂肪酶酶解30分钟，85℃灭酶5分钟，500-1000r/min离心分离10-20min，取上清液，加0.03-0.05％上清液重量的木瓜蛋白酶和0.05-0.09％上清液重量的风味蛋白酶，加热至100℃酶解20-30min，85℃灭酶5min，备用；

(3)把步骤(1)和(2)的中间产物合并，减压浓缩，真空干燥，即得淡水鱼胶原蛋白肽。

本发明先对淡水鱼皮和鱼鳞分别进行特殊工艺的预处理，有利于后续工艺有效成分的提取，再采用分别复合酶解技术，大大缩短了提取胶原蛋白肽的时间，制备的淡水鱼胶原蛋白肽提取率高、纯度高、质量好，可广泛应用于食品、化妆品、生物医学等领域。

本发明的原料淡水鱼可以为青鱼、草鱼、鲢鱼、鲤鱼、鲫鱼、罗非鱼等，均通过检疫，无腐变、无病害，去除鱼肉、鱼鳍，把鱼鳞和鱼皮进行清洗消毒。

具体实施方式：

实施例1：

一种用淡水鱼制备胶原蛋白肽的方法，具体步骤为：

(1)将淡水鱼鱼鳞用5倍重量的蒸馏水浸泡10h，过滤，滤液减压浓缩至原体积的3/4，加稀盐酸调节pH值为5-6，过滤，加入2倍鱼鳞重量的90％乙醇80℃加热回流30min，过滤，滤液加饱和石灰水调节pH值为7，500r/min离心分离10min，取上清液，加0.03％上清液重量的中性蛋白酶和0.04％上清液重量的胶原蛋白酶，加热至100℃酶解20min，85℃灭酶5min，备用；

(2)将淡水鱼鱼皮用5倍重量的50％乙醇浸泡10h，过滤，滤液减压浓缩至原体积的3/4，加稀盐酸调节pH值为5-6，过滤，滤液以2BV/h的速率上AB-8大孔吸附树脂柱，先用50％乙醇以2BV/h的速率洗脱，再用30％乙醇以2BV/h的速率洗脱，滤液、树脂柱、50％乙醇和30％乙醇的体积比为1∶1∶1.2∶1.2，收集洗脱液，加0.02％洗脱液重量的脂肪酶酶解30分钟，85℃灭酶5分钟，500r/min离心分离10min，取上清液，加0.03％上清液重量的木瓜蛋白酶和0.05％上清液重量的风味蛋白酶，加热至100℃酶解20min，85℃灭酶5min，备用；